Mapa Fisico Plasmidio Pbr322
Lo primero que se hizo para analizar el gel de laelectroforesis fue medir las distancias de todas las bandas que se observaron con respecto a su pocillo de carga.
Muestra de las bandas del estándar peso molecular Lambda/HindIII correspondientes a lacolumna 8 del gel de electroforesis.
Se indica el tamaño en pares de bases de cada fragmento
Se indica el tamaño en pares de bases de cada fragmento
Luego utilizando solo los datos de lacolumna 8 del Estándar de peso molecular Lambda/HindIII se construyó una tabla para posteriormente hacer la curva estándar.
Tamaño (pb) | Log (tamaño) | Distancia (cm) |
23.130 | 4,364 | 3.4 |9.416 | 3,974 | 3.7 |
6.557 | 3,817 | 4.2 |
4.361 | 3,640 | 4.9 |
2.322 | 3,366 | 6.1 |
2.027 | 3,307 | 6.5 |
564 | 2,751 | 9.8 |
125 | 2,096 | |
Con los datos que se ven en la tabla serealizó un gráfico de Distancia vs Log(Tamaño)
y = -0,2308x + 4,870
Donde x representa la distancia en centímetros y la Y es el logaritmo del tamaño del fragmento de DNA en pares de basesnitrogenadas.
Carril 1
y = -0,2308 • (4,9) + 4,870
Fragmento de DNA | Distancia (cm) | Log (tamaño) | Tamaño (pb) |
pBR322 sin digerir | 4,2 | 3,90064 | 7954,99 |
| 5,6 | 3,57752 | 3780,24 |pBR322 con EcoRI | 5,1 | 3,69292 | 4930,82 |
pBR322 con EcoRI/AvaI | 5,9 | 3,50828 | 3223,14 |
| 7,6 | 3.11592 | 1305,93 |
pBR322 con EcoRI/PstI | 5,4 | 3,62368 | 4204,16 |
| 9,3 | 2,72356 |529,12 |
pBR322 con AvaI/PstI | 6,5 | 3,73908 | 5483,77 |
Con los datos obtenidos en la tabla se puede construir el mapa físico.
2. Explique lo observado por digestión del DNA plasmidio.3. Explique claramente como procedió para confeccionar un mapa físico.
Se digirió el plásmido pBR322 usando las enzimas AvaI, EcoRI y PstI, haciendo digestiones simples y dobles, cada una de...
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