Medios de cultivo

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OPTIMIZACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO PARA LA PRODUCCIÓN DE UN INOCULANTE CON BASE EN Azospirillum brasilense C16

DIEGO MAURICIO RIVERA BOTÍA

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE PLAN DE ESTUDIOS DE INGENIERÍA DE PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA SAN JOSÉ DE CUCUTA 2008

OPTIMIZACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO PARA LA PRODUCCIÓN DE UN INOCULANTE CONBASE EN Azospirillum brasilense C16

DIEGO MAURICIO RIVERA BOTÍA

Proyecto de grado presentado como requisito para optar al título de Ingeniero de Producción Biotecnológica

Directora RUTH REBECA BONILLA BUITRAGO Ph.D. Ciencias Agrícolas Universidad Agrícola de Varsovia

Codirector ANDRÉS DÍAZ GARCÍA
MSc. Ingeniería Química énfasis en Ingeniería Bioquímica

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULASANTANDER FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE PLAN DE ESTUDIOS DE INGENIERÍA DE PRODUCCIÓN BIOTECNOLÓGICA SAN JOSÉ DE CUCUTA 2008
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AGRADECIM IENTOS

A Dios por estar siempre conmigo y ser mi fortaleza para superarme cada día más y así poder luchar para que la vida me depare un futuro mejor.

A los seres que más amo en este mundo: Mi papa y mi mama por el gran esfuerzo que hanhecho en este primer paso de mi vida profesional, son ustedes quienes verdaderamente son los dueños de este logro, mil gracias

A la Dra. Ruth Bonilla por brindarme su apoyo, su confianza y ser la persona que me extendió la mano para proyectarme profesionalmente.

A la Dra. Vera Lúcia Baldani por su valiosa colaboración y acompañamiento en el desarrollo del proyecto.

A Diana M. Cárdenas porformarme mediante el semillero de investigación y ser una tutora incansable en la búsqueda de la excelencia.

A Mafe por darme los instrumentos para crecer, por su paciencia e interés por orientarme de la mejor forma posible.

A mis amigas Melissa y Ludy, que les debo gran parte de la realización de este proyecto, que Dios las ilumine y que la vida les depare muchos éxitos.

A mi Lucy poraguantarme y tenerme paciencia todo este tiempo, por su esfuerzo y su cariño hacia mi.

A Corpoica y a todas aquellas personas que trabajan en el laboratorio de Microbiología de Suelos y que de una u otra forma participaron en la realización de esta investigación, hago extensivo mi más sincero agradecimiento.
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CONTENIDO

Pág.

INTRODUCCIÓN

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1. EL PROBLEMA

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1.1 TÍTULO

121.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 1.3 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA 1.4 OBJETIVO 1.4.1 Objetivo General 1.4.2 Objetivos Específicos 1.5 JUSTIFICACIÓN 2. MARCO REFERENCIAL 2.1 ANTECEDENTES 2.2 MARCO TEÓRICO 2.2.1 Historia de Azospirillum sp. 2.2.2 Biología de Azospirillum sp. 2.2.3 Genética de Azospirillum sp. 2.2.4 Diseño de un medio de cultivo 2.2.5 Diseños factoriales 2.3 MARCO CONCEPTUAL 2.4 MARCOCONTEXTUAL

12 13 13 13 13 13 15 15 16 16 19 22 23 27 31 32
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2.5 MARCO LEGAL 3. DISEÑO METODOLÓGICO 3.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN 3.2 POBLACIÓN Y MUESTRA 3.2.1 Población 3.2.2 Muestra 3.3 FASES DE LA METODOLOGÍA 3.3.1 Fase I. Conformación banco de cepas y determinación de la cinética de crecimiento de la bacteria Azospirillum brasilense C16. 3.3.2 Fase II. Aplicación modelos estadísticosexperimentales 3.4 INSTRUMENTOS 3.5 TÉCNICAS DE ANÁLISIS Y PROCESAMIENTO DE DATOS 4. RESULTADOS Y DISCUSIONES 4.1 Cinética de crecimiento de A. brasilense C16. 4.1.1 Medio de referencia (Medio Dygs) 4.2 Diseño de un medio de cultivo 4.2.1 Etapa exploratoria (I) 4.2.2 Etapa de optimización (II) 4.3 Composición del medio alternativo 4.4 Estudio económico de los medios de cultivo Dygs y optimizado 5.CONCLUSIONES 6. CONSIDERACIONES BIBLIOGRAFÍA ANEXOS

32 37 37 37 37 37 37 37 41 47 47 48 48 48 51 51 57 65 69 71 72 73 81

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LISTA DE TABLAS Pág.

Tabla1. Identificación de diferentes especies del género Azospirillum sp. de acuerdo a los requerimientos nutricionales. Tabla 2. Matriz Plackett-Burman de 11 factores con 12 tratamientos. Tabla 3. Diseño Box-Behnken para tres niveles de...
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