Metodo Adicion Estandar En Espectrototometria

LA CURVA DE CALIBRADO
Permite determinar la concentración de analitos haciendo uso de patrones o estándares del analito de
concentración conocida.
Para ello, se introducen en el instrumento, varios patrones que contienen concentraciones exactamente
conocidas del analito y se registra la señal instrumental. El rango de concentraciones de las disoluciones
patrón deberán abarcar el intervalo deconcentración esperado en las muestras.
Se utiliza un blanco para corregir la señal instrumental. El blanco contiene todos los componentes de la
muestra original, excepto el analito.
En el siguiente apartado se muestra la curva de calibración para una determinación de Fe+3 en una
muestra.
EL METODO DE LA ADICION ESTANDAR.
-

Se adiciona uno o más volúmenes iguales de disolución estándar aalícuotas de la muestra del
mismo tamaño.
Después de cada disolución se diluye hasta un volumen fijo antes de medir la absorbancia.
Ejemplo:
o Se pipetean varias alícuotas de 10 mL de una muestra de agua mineral en matraces
aforados de 50 mL. A cada uno se adicionan exactamente 0.0; 5.0; 10.0; 15.0 y 20.0 mL
de una disolución patrón que contiene 11.1 ppm de Fe+3 seguido de un exceso de ionTiocianato para dar el complejo rojo Fe(SCN)2+ y se diluyen a 50.0 mL las señales
obtenidas son las siguientes:
Volumen de
muestra, mL
Volumen de
disolución
estándar mL
Volumen de
dilución, mL
Señales de
Absorbancia
o
o

10.0

10.0

10.0

10.0

10.0

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

50.0

50.0

50.0

50.0

50.0

0.240

0.437

0.621

0.809

1.009¿Qué concentración de Fe+3 hay en la muestra de agua?
Calcular la desviación estándar de la pendiente, de la ordenada en el origen y de la
concentración de Fe+3

Gráfica correspondiente:

Fórmula a emplear:

=−
Donde:
Cx = Concentración de analito
Cs = Concentración del estándar
Vx = Volumen de la alícuota de analito
Vs = Volumen de estándar (extrapolado al origen de curva decalibrado)

=−

−6.31

11.1
10.0

Cx = 7.01 ppm Fe+3
-

Si se cuenta con poca cantidad de muestra o se necesita ahorrar tiempo, el método de la adición
estándar puede realizarse agregando un solo volumen de estándar a una de dos alícuotas de
muestra. Se emplea la ecuación siguiente:

Donde:
S1 y S2 = señales del instrumento
Cs = Concentración del estándar
Vs = Volumen empleado deestándar
Vx = Volumen de alícuota del analito

En el siguiente ejemplo se ilustra la variante anterior:
2.0 mL de muestra de orina fueron tratados con un reactivo generados de color con el fosfato. A
continuación se diluyó la muestra a 100 mL Otros 2.0 mL de la misma muestra se agregaron
exactamente 5.00 mL de una disolución estándar de fosfato que contenía 0.03 ppm de fosfato y se trató
de lamisma manera que la muestra original.
Los datos que se obtuvieron son los siguientes:
Volumen de muestra, mL
Volumen de Estándar, mL
Volumen de dilución, mL
Señal obtenida

2.0
0.0
100.0
0.428

2.0
5.0
100.0
0.538

La concentración de fosfato se calcula con la ecuación citada anteriormente

=

0.428 5.0
0.03 /
0.538 − 0.428 2.0

Cx = 0.292 mg PO43-/mL de muestra

ANALISISDE MEZCLAS ABSORBENTES
Cuandoi se mide la absorbancia de una solución, a una longitud de onda determinada, esta medición
incluye a las absorbancias de todas los componentes de la solución. De ahí que la absprbancia medida es
la suma de las absorbanc ias de los componentes constituyentes de la disolución. Esto es:
Asolución = A1 + A2 + A3+…….+An
Donde:
A1 = E1bC1
A2 = E2bC2

(Absorbancia decomponente 1 de la solución) (a λ1)
(Absorbancia de componente 2 de la solución) (a λ2)

y Ei es la Absortividad molar del componente a una determinada longitud de onda

La determinación suele realizarse a dos longitudes de onda, a efectos de poder establecer relaciones
matemáticas que permitan determinar concentraciones de cada componente de la solución.

Para una solución que...