Metodo Kjeldahl
Bromatología y análisis de alimentos
LABORATORIO Nº 5
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS. MÉTODO KJELDAHL
Objetivo: Cuantificar el contenido proteico de un alimento.
Fundamentoteórico
El método Kjeldahl se utliza para determinar el Nitrógeno total. Está basado en la destrucción de la materia orgánica por ácido sulfúrico concentrado, el cual se reduce en parte a SO2 , elque a su vez reduce al N2 de la materia orgánica a NH4 y que luego en presencia de H2SO4 (digestión) forma sulfato de amonio. El NH3 se libera con NaOH y al destilarlo se recibe sobre ácido sulfúrico0,1N. Finalmente, el ácido excedente se valora con NaOH 0,1N, por diferencia se cuantifican los meq de NH3 y se calcula la masa de nitrógeno, la cual multiplicada por el factor 6,25 entrega elequivalente en proteínas.
Materiales
H2SO4 conc.
NaOH 0,1 N
H2SO4 0,1 N
Mezcla catalizador: CuSO4 y K2SO4
Balanza analítica
Equipo Kjeldahl (digestor y destilador)
Campana extractora degases
Bureta
Pipeta de 50 ml (volumétrica)
propipetas
Matraz de 500 ml
Indicador fenolftaleína
Guantes de seguridad
Tabla de Composición Química de los Alimentos Chilenos
Cálculos previosUtilizando la Tabla de Composición Química de los Alimentos Chilenos se calcula la cantidad teórica a pesar de alimento, el peso de muestra debe ser equivalente a 30 mg de N2. Para el cálculo se sumael contenido de proteínas (g prot./ 100 g alimento) aportado por cada ingrediente y con esto se calcula la cantidad a pesar de muestra equivalente a 30 mg de N utilizando la siguiente fórmula:Masa (g) de N en 100 g de alimento (N) = % proteínas del alimento (tabla)
6,25
Donde 6,25 corresponde al contenido promedio(16%) de N en 100 g de proteína =100/16
Luego en 100 g alimento = X (gr de alimento a pesar)
N...
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