Metodolgia

Solo disponible en BuenasTareas
  • Páginas : 3 (569 palabras )
  • Descarga(s) : 0
  • Publicado : 13 de noviembre de 2010
Leer documento completo
Vista previa del texto
Metodología.
La metodología seguida para la realización de la presente práctica fue primeramente pesar 4 lotes de semillas de ajonjolí de 2.5g cada uno; de estos lotes sólo 2 se lavaron conhipoclorito de sodio. Posteriormente los 4 lotes se colocaron en frascos de boca ancha los cuales fueron tapados con gasas, envueltos en papel aluminio y puestos boca abajo en una bandeja con agua por 4 días.Para el día de la práctica se prepararon dos homogenizados, donde en un mortero frío se colocaron 2.5g de semillas germinadas y 10ml de amortiguador de fosfatos 3mM y todo se trituró con el pistilohasta obtener el homogenizado; lo mismo se realizó para el otro homogenizado, sólo que se colocaron 2.5g de semillas no germinadas.
Después ambos homogenizados se centrifugaron a 15000rpm por 15minutos; esto se realizó tantas veces fuera necesario hasta que se obtuvieran filtrados claros, ya obtenidos los extractos se guardaron a baja temperatura.
Para determinar proteínas en los extractos desemillas de ajonjolí se prepararon 9 tubos como lo indica la tabla1:
Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Solución patrón de caseína (ml) 0.25 0.5 0.75 1 - - - - -
Extracto sin germinar (ml) - - - - 1 - - - -Extracto germinado (ml) - - - - - 1 - - -
Extracto diluido (1:10) sin germinar (ml) - - - - - - 1 - -
Extracto diluido (1:10) germinado (ml) - - - - - - - 1 -
NaCI 1% (ml) 5.75 5.5 5.25 5 5 5 5 5 6Reactivo de Biuret (ml) 4 4 4 4 4 4 4 4 4

Después de 30 minutos se configuró el blanco con el tubo 9; se leyeron a 540nm.
Para determinar carbohidratos en los extractos se prepararon 10 tuboscomo lo indica la tabla 2:
Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Solución patrón de glucosa (ml) 0.2 0.4 0.6 0.8 1 - - - - -
Agua destilada (ml) 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Extracto sin germinar1:20 (ml) - - - - - 0.5 - - - -
Extracto germinado 1:20 (ml) - - - - - - 0.5 - - -
Extracto sin germinar 1:50 (ml) - - - - - - - 0.5 - -
Extracto germinado 1:50 (ml) - - - - - - - - 0.5 -
Reactivo...
tracking img