Microbiologia

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Variante histológica
Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina.Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:
ácido periódico 58%
carbol fucsina deZiehl (fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado:
0,5 g fucsina básica
50 cc agua destilada
5 cc etanol absoluto
28,5 g cristales de fenol derretidos
hematoxilina
alcohol ácido 1%:alcohol de 35º
ácido clorhídrico
El procedimiento es el siguiente:
desparafinar e hidratar los cortes
ácido periódico 5%, 10 min
lavar con agua destilada
fucsina fenicada, 15 min
decolorar enalcohol ácido al 50%
lavar con agua destilada
hematoxilina, 10 min
azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
deshidratar, aclarar y montar preparaciones
[editar]Resultados
BAAR: rojo.Núcleos: azul semiamarillo.
[editar]Variante clásica o "en caliente"
Ésta y la siguiente variantes son para preparaciones citológicas.
Hacer un frotis de la muestra.
La fijación al calor asegurará deque el frotis quede adherido al portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados falsamente negativos y un frotis muy grueso puede desprenderse del portaobjetos durante la tinción.
Utilizandopinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de tinción con los extendidos hacia arriba. Nunca tiña más de 12 portaobjetos a la vez.
Dejar el frotis sobre el puente de tinción.
Aplicarfucsina-fenicada.
Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos durante 5 minutos. Mantenga el calor durante este período.
Calentar con un mechero hasta la emisión de vapores (3-5 minutos).
Serequiere el tiempo adecuado para que la fucsina fenicada penetre y tiña la pared celular de la bacteria. No deje que hierva o se seque el colorante.
Lave suavemente el colorante de cada portaobjetoscon agua corriente fría hasta que toda la tinción libre quede lavada. Lave suavemente de manera que el extendido no se barra del portaobjetos. Retire el exceso de agua.
Decolorar con alcohol-ácido....
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