Microorganismos Del Ambiente

MANUAL PRÁCTICO DE MICROBIOLOGÍA - Tomo II: Microbiología Ambiental II
Manacorda A. M., Cuadros D. P y Álvarez A. S.

Año 2006

Capítulo 1
MICROORGANISMOS DEL AMBIENTE
Objetivo:

•

Poner en evidencia la presencia de los microorganismos existentes en el ambiente: aire; superficie de
materiales y del cuerpo.

Introducción:
El aire además de partículas en suspensión, es portador debacterias en forma vegetativa o esporuladas,
esporos de hongos y virus. Por ello puede ser causa tanto de contaminación de alimentos como de
infecciones en el hombre (patologías respiratorias, etc.).
Los microorganismos se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, en el agua, en la
superficie de los objetos e incluso sobre nuestra piel.
Un alimento puede estar contaminado en suorigen o bien puede ser el manipulador quien lo contamine
durante el procesado. La persona que va a manipular un alimento tiene una abundante carga microbiana
en la piel, pero nunca deberán aislarse de ellas bacterias patógenas. Por lo tanto resulta evidente la
necesidad de que el manipulador mantenga una perfecta condición de higiene durante el procesado de los
alimentos.
Cuando se trabajaen Microbiología de los alimentos es importante determinar el grado de contaminación
ambiental, ya que de las condiciones higiénicas del lugar de trabajo (utensilios, superficies, etc.) y del
propio manipulador van a depender en parte el número y tipo de microorganismos en el alimento.
Materiales necesarios:
Para el análisis de esporas de hongos en aire por sedimentación
− Placas de agarSabureau para recuento en placa.
Para el análisis de superficies planas

− Placas de contacto RODAC (Replicate Organisms Direct Agar Contac) con agar para recuento en
placa.
Para el análisis de superficies no planas

− Hisopo estéril.
− Tubo con 10 ml de solución salina estéril.
− Papel de aluminio estéril con una abertura central de 9 cm2
Para el análisis de manipuladores
− Hisopo estéril− Placas de agar para recuento en placa.
− Placas de agar manitol sal
− Placas de agar violeta rojo bilis glucosa (VRBG)
Para todos los análisis se utilizará estufa a 37 ºC
Desarrollo:
Análisis del aire
Existen distintos métodos para el análisis del aire: sedimentación, filtración, choque en líquidos y
precipitación electrostática, entre otros. Durante este trabajo práctico vamos a realizarel primer método
(uno de loa más empleados junto con filtración).

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Manacorda A. M., Cuadros D. P y Álvarez A. S.

Año 2006

El método de sedimentación en placa es uno de los más sencillos para la determinación de
microorganismos del aire. A pesar de ellos los resultados obtenidos son orientativos de las cifras demicroorganismos presentes en el aire, ya que estos niveles varían en función de las corrientes de aire y del
tamaño de las partículas en suspensión.
Análisis de esporas de hongos por sedimentación:
1) Destapar las placas con agar Sabureau, en un lugar cuyo nivel de contaminación se desee examinar,
durante diferentes intervalos de tiempo: 0,5, 1 y 1,5 horas.
2) Tapar las placas e incubardurante 24-48 horas a 37 ºC.
3) Discutir los resultados en grupo.

Análisis de superficies
Existen distintos métodos para el examen microbiológico: método del hisopo, de la placa de contacto, de
la jeringa de agar, de la legüeta (o película pegajosa). En esta práctica realizaremos el análisis de
superficies por medio del método del hisopo (para el estudio de superficies no planas) y el de placade
contacto o RODAC (para el estudio de superficies planas).
A. Análisis de superficies planas por placas de contacto (RODAC):
1) Emplear placas de Petri especiales de 6 cm de diámetro, con una superficie de 25 cm2 (ver Fig. 1)
que llevan el medio de cultivo (para microorganismos aerobios mesófilos totales). El medio una vez
fundido y a temperatura cercana a la de solidificar (45 º C), se...