Micropropagacion de capsicum

Micropropagación, Avances y Aplicaciones Biotecnológicas de
Capsicum annuum
Bastian K. Perez Prado
Biotecnología Vegetal
Introducción
Chile (Capsicumsp.)
El género Capsicum pertenece a las solanáceas e incluye alrededor de 27 especies, es un
género de plantas angiospermas, dicotiledóneas nativo de las regiones tropicales y
subtropicales de América, probablemente en el área comprendidaentre Bolivia y Perú,
donde se han encontrado semillas de formas ancestrales, que datan de más de siete mil
años, y de donde, se especula, se diseminó al resto del continente americano (Pickersgill,
1988).
La horticultura es una actividad agrícola de gran importancia tanto en la agricultura
nacional como mundial. Particularmente, el cultivo de chile (Capsicumannuum.)
representa una actividadimportante en el ámbito mundial, cultivándose en años recientes
25, 149,997 toneladas según datos de la FAO (2004).
El cultivo de tejidos puede definirse como un conjunto de técnicas que permiten el cultivo
en condiciones asépticas, y constituyen dentro de la biotecnología, la técnica que mayor
aporte práctico han brindado. Sus aplicaciones son varias: regeneración de plantas,
obtención deplantas libres de patógenos (Morel y Martin, 1995) conservación de
germoplasma (Withers, 1985), producción de metabolitos secundarios (Misawa, 1994), el
mejoramiento genético mediante la inducción de mutaciones y la selección in vitro (Perez
et al. 1998).
Micropropagación
El medio de cultivo más utilizado para realizar la propagación mediante explantes de
distintas partes de la planta es el MS(Murashige y Skoog 1962) más suplementos para
cada tipo de explante.
Desinfección de explantes
En su gran mayoría (casi en el 100% de los casos), el protocolo para el tratamiento de
desinfección utilizado consiste en el lavado de los explantes con agua corriente y
posteriormente tratados con fungicida a razón de 1g/L durante 10 minutos. En seguida

son llevados a la cámara de flujo laminar,donde se aplicauna doble desinfección con
hipoclorito de calcio (Ca(OCl)2) a concentraciones de 10 y 8% durante 20 y 15 minutos
respectivamente. Finalmente se realiza una serie de 3 enjuagues de 10 minutos cada uno
en agua bidestilada estéril.
Producción de Callos
Con el objetivo de obtener callos friables adecuados para el establecimiento de
suspensiones celulares, se utilizaron porcionesde hojas de las plantas cultivadas in vitro.
Las hojas son cortadas en segmentos de 1cm2 aproximadamente eliminando el borde y la
vena central, luego se colocan con el envés en contacto con el medio de cultivo. Se utiliza
un medio MS suplementado con vitaminas, sacarosa al 8% (Kintzion et al. 2001) y distintas
combinaciones de reguladores de crecimiento. Los cultivos son incubados en laoscuridad
por 3 semanas a una temperatura de 27 ± 2°C. Posteriormente se transfieren a la luz bajo
un fotoperiodo de 12 horas de luz con una temperatura de 29 ± 2°C.
Los mejores medios de cultivos utilizados para la formación de callos:

Los callos que posean características interesantes, pueden ser llevados a una
multiplicación en medio líquido, procedimiento que consiste en adicionar una porciónde
callo en medios de cultivo para suspensiones celulares de Capsicum (Buyukalaca y
Mavitun, 1996) y de Musa (Cotê er al. 1996) el cual evaluara la calidad embrionaria de las
suspensiones.

Explante

Apices

Medio
de
Cultivo
MS

Yemas

MS

Anteras

MS

Suplementos

Tiempo de Temperatura
incubación de
incubación
Sacarosa
y
BAP Mínimo
29 ± 2°C
(Concentraciones
unmes.
relativas para cada fin
del cultivo).
1.5 y 0.5 mg/mL de Mínimo
29 ± 2°C
BAP
un mes.
Vitamins de Morel y Hasta el 27 ± 2°C con
Wtmore (1951), Mio- desarrollo choques
inositol
(100mg/L), de callos.
térmicos de
adenina (50mg/L) y
4°C
por
sacarosa al 3%
24horas.

Fotoperiodo

12:12 horas

12:12 horas
16:8 horas

*El cultivo de anteras permite obtener líneas homocigóticas...