MÉTODOS DE ESTUDIO DE LA CÉLULA

I) Biomoléculas

1) Métodos y Origen de los seres vivos

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MÉTODOS DE ESTUDIO DE LA CÉLULA

CLASIFICACIÓN
Clasificaremos los métodos que se utilizan para el estudio de la célula en dos grandes
grupos:
I) Técnicas para el estudio fisicoquímico: sirven para conocer la composición y relacionar
esta composición con las estructuras celulares. Estos métodos son:
a) Centrifugación
b)Cromatografía
c) Electroforesis
d) Cultivos "in vitro"
II) Técnicas para el estudio morfológico de la célula. Nos permiten conocer cómo es su forma,
su tamaño y su estructura. Son, fundamentalmente:
a) Microscopía óptica
b) Microscopía electrónica
1) Microscopio electrónico de Trasmisión (MET)
2) Microscopio electrónico de barrido (MEB)

I) TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO FISICOQUÍMICO DE LA CÉLULAEste tipo de métodos se utilizan para el aislamiento, localización e identificación de las
sustancias que constituyen la materia viva.
Presentan dos problemas principalmente:
a) Los componentes de un ser vivo se encuentran formando mezclas muy complejas.
b) La mayoría de las sustancias que encontramos en los seres vivos son, a su vez, de una
gran complejidad.
Pensemos,por ejemplo, que unasola de los varios miles de proteínas que contiene una
célula puede estar formada por más 5000 aminoácidos.
Pasemos a continuación al estudio de cada uno de estos métodos.

J. L. Sánchez Guillén

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A) CENTRIFUGACIÓN
Consiste en la separación de los componentes
de una mezcla en función de las diferencias
entre lasvelocidades que presentan al
someterlos a elevadas aceleraciones (g). Esto se
consigue haciendo girar la mezcla en un rotor a
un gran número de vueltas por minuto. Los
aparatos empleados con este fin se denominan
ultracentrífugas.
Esta técnica requiere los siguientes pasos:
1)
FRACCIONAMIENTO
U
HOMOGENEIZACIÓN: El material biológico, por
ejemplo: un fragmento de tejido del hígado, estriturado para disgregarlo y romper las
membranas celulares.
La rotura de las membranas deja en libertad los
orgánulos celulares y el contenido del
hialoplasma. Si la homogeneización se realiza
suavemente, los orgánulos permanecerán
intactos. Obtendremos así una "papilla" que
estará compuesta de restos de membranas,
orgánulos celulares, núcleos, moléculas libres y
agua.

Fig. 1Homogeneizador.

Fig. 2 Centrífuga.

2) CENTRIFUGACIÓN: Las ultracentrífugas son
máquinas que consiguen velocidades de rotación
muy elevadas, hasta 500.000 v/mn. En el
interior de estos aparatos se alcanzan grandes
aceleraciones que se miden en g (1g =9,8
m/s2). En una ultracentrífuga pueden alcanzarse
hasta 100.000 g. Los materiales biológicos
sometidos a estas aceleraciones se desplazan
haciael fondo de los recipientes que los
contienen con velocidades que dependen de su
masa, de su forma y volumen, y de la naturaleza
del medio en el que se realice la centrifugación.
B) CROMATOGRAFÍA

Fig. 3 Cromatografía de papel.

Se fundamenta en la separación de los
componentes de una mezcla por sus diferencias
de absorción. Éstas diferencias van a ser debidas
a las fuerzas de Van derWals que se establecen
entre los componentes de la mezcla y una
sustancia que actúa de fase estacionaria. Según
la naturaleza de la fase estacionaria, tendremos
los siguientes tipos de cromatografía:
1) CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL:
Se
emplea para la separación de sustancias
químicas que presenten propiedades muy
parecidas. Se opera de la siguiente manera. Una

J. L. Sánchez GuillénFig. 4 Cromatografía de gases.

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pequeña cantidad de la mezcla a separar se deposita sobre un fragmento de papel poroso en
el que quedará embebida. A continuación se introduce el borde del papel en una sustancia en
la que sean solubles los componentes de la mezcla que queremos separar. El disolvente se
desplazará por...