Observacion de mitocondrias (practica)

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“Observación de mitocondrias”

OBJETIVO: 
Identificar mitocondrias en células de levadura a través de una tinción y microscopía óptica.
MATERIALES:
* Solución de glucosa al 5%
* Microscopio compuesto
* 24 horas antes de la práctica, agregar 10 granos de levadura a 5mL de solución de glucosa al 5% a temperatura ambiente dejarlo sin cubrir (ambiente aeróbico). Transportarla deigual manera.
* Portaobjetos
* Cubreobjetos
* Colorante Verde de Janus al 0.001%
* Agua destilada
* 3 Cajas de Petri
INTRODUCCIÓN:
Al proceso de producción de energía en presencia de O2 a partir de un sustrato se le llama respiración, la cual se  realiza en las células en tres fases fundamentales:  la primera fase concluye en el citosol con la formación del ácido pirúvicosi el sustrato es glucosa; luego, tras su transformación en acetil CoA, entra a una segunda fase al interior de las mitocondrias donde éste es metabolizado en el ciclo de Krebs, dando como producto electrones o equivalentes reductores, los cuales pasan a la cadena respiratoria, llamada también cadena de transporte de electrones donde finalmente se produce el adenosin-trifosfato o ATP. 
Estas dosúltimas fases se producen solo si el medio es aeróbico.  En todo el proceso participa gran cantidad de enzimas y se verifican muchas reacciones de óxido-reducción.  El ciclo de Krebs y la fosforilación oxidativa se desarrollan en las mitocondrias de células eucariotas. 
 

FUNDAMENTOS.
MITOCONDRIAS
Son organelos citoplasmáticos membranosos característicos de las células eucarióticas. Se habríanoriginado, al igual que los cloroplastos, en momentos tempranos de la evolución a partir de la endocitosis de bacterias fotosintéticas (teoría endosimbiótica). Las mitocondrias poseen una gran importancia, ya que en ellas se realizan una serie de reacciones de óxido-reducción que permiten el sustento energético de la célula. De esta manera, y de forma general, células que realizan un mayor gastode energía poseerán una mayor cantidad de mitocondrias. Su dimencion varia entre 1 a 10 u.
Se las pueden observar in vivo mediante tecnicas de coloracion vital:verde jano(se tiñen de color rojo) ;o con hematoxilina ferrica.-
Pudiendo las mismas adoptar distintas formas:
· Granular
· Bastoniforme
· Filamentosas

Estructura
La microscopia de luz muestra a las mitocondrias nitidamente teñidasde manera uniforme ; pero para dilucidar su verdadera estructura debemos de valernos de la microscopia electronica con mayor poder resolutivo. Demostrando entonces que la mitocondria consta de 2 membranas paralelas separadas por un espacio estrecho(membrana externa e interna en razon a su ubicación ) o interestructural este espacio esta ocupado por una Sustancia homogenea denominada matrizmitocondrial que es de menor opacidad a los rayos electronicos ,contienen enzimas del ciclo del acido citrico .la membrana interna emite hacia el interior de la mitocondria evaginaciones laminares a manera de tabiques incompletos que no llegan a segmentar el espacio interestructural estas prolongaciones se denominan crestas
mitocondriales.-

Variantes de las crestas
Generalmente las crestas sonlaminares y perpendiculares al eje mayor de la mitocondria pero existen crestas irregulares en forma de dedo tubulares ,o paralelas al eje como en los espermatogonios humanos a veces encontramos crestas angulares ;tambien es variable el numero de crestas, asi existen mitocondrias con crestas escasas y cortas o por el contrario hay casos en los que las crestas son supernumerarias y casi no dejanespacio para la matriz intramitocondrial .

Particulas elementales
Dentro de la membrana interna encontramos estructuras que miden entre 80 a 100 a y estan distribuidas en la superficie de la membrana interna su numero varia entre 10000 a 100000 por mitocondria.cada particula consta de cabeza; tallo y pieza basal .la cabeza mide 100 amstrongs de diametro y el pediculo mide 40 a 50 amnstrongs...
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