Ocratoxina

Rev Chil Nutr Vol. 37, Nº2, Junio 2010

DETERMINACIÓN DE OCRATOXINA-A POR HPLC CON DETECCIÓN POR FLUORESCENCIA (HPLC-FL): UN NUEVO MÉTODO ESTANDARIZADO PARA MUESTRAS DE TRIGO OCHRATOXIN-A DETERMINATION BY HPLC WITH FLUORESCENCE DETECTION (HPLC-FL): A NEW STANDARDIZATION METHOD FOR WHEAT SAMPLES
Mario L. Teixeira (1), Daiane Pertuzzatti (2), Débora C. Leite (3), Luis Flavio S. Oliveira (2),Alexandre M. Fuentefria (4) (1) Curso de Medicina Veterinária - Instituto Federal Catarinense - Campus Concórdia, Brasil (2) Centro de Ciências da Saúde - Universidade Comunitária Regional de Chapecó, Brasil (3) PPGCA - Universidade Comunitária Regional de Chapecó - SC (4) Departamento de Análises - Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Brasil RESUMEN El objetivo principal de este estudio fueevaluar la presencia de Ocratoxina-A (OTA) en los granos del trigo y harina del trigo realizadas por un nuevo método de determinación que usa la cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) acoplada al descubridor del fluorimetrio. El experimento usó seis muestras de grano de trigo del lugar del almacenamiento diferente a la industria local de Chapeco (SC), Brasil Sur, en agosto, 2008. Elextracto de OTA era llevado a cabo usando el acetonitrila:agua (120:80 v/v) como solventes. Después el suprenadante fue filtrado, y aplicado en la columna del inmunoafinidad específica a OTA. Además, la columna se lavó con agua y la toxina era el eluido con el metanol. La determinación del OTA se realizó por detección de fluorescencia acoplado al aparato de HPLC. Los volúmenes de OTA en los granos deltrigo y harina del trigo eran entonces los determínate y los resultados mostraron una concentración de OTA menor que los límites exigidos por la legislación internacional. Palabras clave: Ocratoxina-A, CLAR, métodos del fluorescencia, trigo. Este trabajo fue recibido el 4 de Mayo de 2009 y aceptado para ser publicado el 1 de Abril de 2010.

INTRODUCTION Mycotoxins are secondary metabolitesproduced by some species of filamentous fungi. Under favorable conditions, as temperature and umit, the fungi are capable to produce poisonous effects in animals as in humans (1,2). The grains contamination by mycotoxins have been described in several vegetable phases crops, especially whether there are the presence of bioclimatic favorable conditions, insects infestation or other factors which increasethe metabolic stress of the plants (2-4). The Food Agriculture Organization (FAO) indicated the aflatoxins, ochratoxin, T-2 toxin, deoxynivalenol, and fumonisins like the five main mycotoxins (5). On the other hand, in Brazil and in South America there are large prevalence of the patulin, trichothecenes and zearalenone than T-2 toxin (6).

The ochratoxins form a group of seven (7) secondarymetabolites produced by some fungi belong to Aspergillus and Penicillium gender (8). However, the ochratoxin A (OTA) is the most natural abundant form in foods (7). Chemically they are composed by non-enzymatic bond between a ß-fenilalanin and some isocumarine species by amide bond (5). It is happened under propitious conditions like water activity and temperatures above 30ºC (9). The presence of OTAhas been found in different components of the diet, such as corn, barley, bean, peanut, coffee, soy, wheat, saracen, rye, rice, sorghum, and Para chestnut (5). The OTA effects on humans tissue has been reported like capable of causing nephrotoxic, nephrocarcinogenic and hepatotoxic events (5). However, the main toxic ef-

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fect is the nephrotoxicity. In line with this, the proximal tubule seems to be the structure that is most affected, where the OTA causes cytotoxicity and carninogenicity (10). The clinical manifestations communly are evidenciated by polyuria, and consequently renal tubular epithelium hyperphasia, and cells hepatic necrosis, which could be...