Odontologia

PRACTICA
MEDIOS
DE
CULTIVO
Y
CRECIMIENTO
BACTERIANO
ALUMNOS DE CIRUJANO DENTISTA TURNO VESPERTONO 2:c
MATERIA: BASES DE MICROBIOLOGIA
CATEDRATICO RESPONSABLE DE LA PRÁCTICA: MIGUEL HERNANDEZ DE LA CRUZ

ALUMNOS:
LUIS ERIBERTO MATEOS BERNAL
JONATHAN SALVADOR RODRIGUEZ SANCHEZ
DOROTHY DEL CARMEN VELASCO CANTARELLY
YONI ALBERTO VALENCIA VELASQUEZ
JENNER RAMIREZ LOPEZPRACTICA
INOCULACION BACTERIANA
Y
TINCION
DE
GRAM
EN
BACTERIAS
GRAM
+,-
OXIDASA Y CATALASA
CATEDRATICO RESPONSABLE DE LA PRÁCTICA: MIGUEL HERNANDEZ DE LA CRUZ
MATERIA: BASES DE MICROBIOLOGIA

ALUMNOS: LUIS ERIBERTO MATEOS BERNAL
JONATHAN SALVADOR RODRIGUEZ SANCHEZ
JENNER RAMIREZ LOPEZ
YONI ALBERTO VALENCIA VELASQUEZ
DOROTHY DEL CARMEN VELAZCO CANTARELLY

INTRODUCCION
Losorganismos vivos son incoloros y presentan pobre contraste cuando se observan al microscopio. Cuando los organismos son teñidos antes de observarlos, aumenta en gran medida el contraste de las células y su medio.

Antes de teñir es necesario hacer un frote y fijarlo. Un frote es una delgada capa de células que cubre un área de un portaobjetos, este frote debe ser secado al aire y fijado por caloro químicamente con alcohol. Así los frotes no fijados son lavados en el proceso de tinción.

Existen varias técnicas de tinción ocupadas en Microbiología, por ejemplo:
• Tinción simple o directa.
• Tinción diferencial.
• Tinción de estructuras.
• Tinción negativa.
• Tinción de material de reserva, etc.


La tinción más empleada en microbiología es la de Gram, que es una tincióndiferencial. Los microorganismos difieren entre sí desde el punto de vista químico y físico por lo que reaccionan de manera diferente a los colorantes. Las tinciones diferenciales ocupan dos colorantes, uno primario y otro de contraste o secundario.

Para la tinción de Gram el colorante primario es cristal violeta mientras la safranina
Corresponde al de contraste. La tinción de Gram clasifica a losmicroorganismos según su capacidad de retener el colorante primario (Gram positivas) o el colorante de contraste (Gram negativas).

OBJETIVOS
1. Aprender el fundamento y la técnica de la Tinción de Gram para determinar la morfología microscópica de diferentes cepas.

MATERIAL
1. Mechero
2. Asas Bacteriológicas
3. Placas sembradas con diferentes microorganismos.
4. Portaobjetos5. Colorantes de Gram
6. Microscopios

PROCEDIMIENTO

1. Hacer un frote de las colonias caracterizadas, tomando con el asa bacteriológica una pequeña muestra de la colonia aislada y mezclarla con una gota de agua sobre un portaobjetos. Extender esta suspensión y dejar secar.
2. Fijar el frote por calor deslizando el portaobjetos sobre la flama del mechero.
3. Cubrir el frotecon cristal violeta y dejarlo actuar por un minuto. Escurrir el colorante y lavar con chorro suave de agua corriente.
4. Cubrir el frote con lugol, dejarlo actuar por un minuto. Escurrir y lavar.
5. Decolorar el brote con alcohol acetona, de 5 a 30 segundos. Escurrir y lavar.
6. Cubrir el brote con safranina y dejarlo actuar por 30 segundos. Escurrir y lavar.
7. Dejar secar alaire.
8. Observar el frote con objetivo de inmersión.
9. Determinar la morfología microscopia y la respuesta a la tinción de Gram de cada cepa empleada.

RESULTADOS ESPERADOS
Mediante la tincion se observo bacilos Gram (-) identificados de acuerdo a su pared celular.

INTRODUCCION
Un medio de cultivo es un sustrato que proporciona los nutrientes necesarios para el desarrollo delmicroorganismo a probar. Los microorganismos presentan diferencias en sus requerimientos nutricionales que son reflejo de la extrema diversidad bioquímica y fisiológica. El agua, sales inorgánicas, fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno y metales son necesarios a todos microorganismos. Existen bacterias que necesitan la presencia de determinado nutriente, sin el cual no pueden desarrollarse, este...