Operon lactosa

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  • Publicado : 29 de noviembre de 2011
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Recordemos:

. El compuesto sintético o-nitrofenil-β-D-galactósido (ONPG) también es reconocido como un sustrato y se pegaba a la galactosa y la producción o-nitrofenol que tiene uncolor amarillo. Cuando ONPG es en exceso de la enzima en una reacción, la producción de o-nitrofenol por unidad de tiempo es proporcional a la concentración de β-galactosidasa, por lo que laproducción de color amarillo se puede utilizar para determinar la concentración de la enzima.

 1 unidad de Miller para no inducido E. coli (bajo β-Gal de producción) y aproximadamente 1.000 unidades deuna cultura totalmente inducida (cultivados en lactosa o IPTG).

uno totalmente inducida operón lac + (+ IPTG) = 1500 unidades

uno uniduced operón lac + (sin IPTG) = 1,5 a 3 unidades

eltratamiento:

|Tubo No |1 |2 |3 |4 |5 |6 |7 |
|Cultivo |0,2 |0,2|0,2 |0,2 |0,2 |0,2 |- |
|Solución fisiológica |1,0 |0,8 |0,8 |0,8 |0,8 |0,6|1,0 |
|IPTG (40 mM) |- |0,2 |- |- |- |- |- |
|Lactosa (5%) |-|- |0,2 |0,2 |0,2 |0,2 |0,2 |
|Cloranfenicol(30 mg/ml) |- |- |- |- |0,02|- |- |
|Glucosa (10%) |- |- |- |- |- |0,2 |- |

• Resultadosdel grupo 5 en UM:

|Tubo |Abs 600nm |Abs 420nm |UM |
|1 |0,058 |0,131 |41,826 |
|2 |0,102...
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