pcr tecnica

Páginas: 22 (5251 palabras) Publicado: 24 de junio de 2014
www.medigraphic.org.mx
Tecnología en salud
Vol. 2, Núm. 2
Mayo-Agosto 2013
pp 70-78

Fundamentos de la reacción en cadena
de la polimerasa (PCR) y de la PCR en tiempo real
Tamay de Dios L,* Ibarra C,** Velasquillo C*
* Laboratorio de Biotecnología,
Centro Nacional de Investigación y Atención a Quemados.
Instituto Nacional de Rehabilitación (INR), México, D.F.
** Unidad de Ingenieríade
Tejidos, Terapia Celular y
Medicina Regenerativa. INR.
Dirección para correspondencia:
M. en C. Lenin Tamay de Dios.
Avenida México-Xochimilco Núm.
289 Col. Arenal de Guadalupe,
14389, Tlalpan, México DF.
E-mail: biotamay@yahoo.com.mx
Este artículo puede ser consultado
en versión completa en:
http://www.medigraphic.com/rid

Palabras clave: PCR, Taq ADN
Polimerasa, PCR en tiemporeal, SYBR Green, Taqman.

Key words: PCR, Taq DNA
Polymerase, Real Time PCR,
SYBR Green, Taqman.

Resumen
A tres décadas de su aparición, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas
en inglés) es una de las herramientas tecnológicas más innovadoras para el estudio de los
ácidos nucleicos. Se caracteriza por ser una técnica de alta sensibilidad, reproducibilidad yeficiencia, que genera resultados confiables en poco tiempo y fáciles de analizar. Por ello,
se ha convertido en el método de elección de muchos investigadores para los estudios genéticos y de biología molecular. En esta revisión nuestro objetivo es introducir al lector a los
fundamentos de la reacción en cadena de la polimerasa, así como a la reacción en cadena
de la polimerasa en tiempo real; dostécnicas que parten de un principio similar, pero que
son metodológicamente diferentes; la primera genera resultados cualitativos mientras la
segunda cuantitativos.

Abstract
After three decades of discovering utility of polymerase chain reaction, its methodology has become one of the most employed tools for the study of nucleic acids. This is a
top sensitive, highly reproductible, very efficientand short time consuming technology
that allows to obtain reliable and easy to evaluate results. Objectives of this paper deal
with fundamentals of both techniques standard polymerase chain reaction as well as the
polymerase chain reaction on real time. Results produced by standard polymerase chain
reaction are qualitative, while those produced by polymerase chain reaction on real time
arequantitative.

Introducción
La gran complejidad de los procesos biológicos en los
seres vivos ha sido por años la razón por la que los
investigadores han centrado su atención en descifrar
los mecanismos que se esconden detrás de esos procesos. Desde las primeras observaciones de Gregorio
Mendel hasta la actualidad, se tiene la noción de que
parte de la explicación de los diferentesfenómenos
biológicos se encuentra escondida en lo más recóndito del genoma celular y que una de las claves para
entender dichos fenómenos es el estudio de los genes. Uno de los descubrimientos más importantes de
la historia que marcó el inicio de una nueva era en el
estudio y conocimiento de los ácidos nucleicos fue el
de Watson y Crick, al descifrar la estructura del ADN1
(ácidodesoxirribonucleico). Desde entonces, varios
grupos han mostrado un gran interés por desarrollar

métodos sensibles y reproducibles que les permitan
estandarizar protocolos experimentales para estudiar
los ácidos nucleicos. Es así como han ido apareciendo
diferentes tecnologías cuyos protocolos están dirigidos
al estudio del ADN; probablemente, la más importante
sea la reacción en cadena de la polimerasa(PCR, por
sus siglas en inglés), desarrollada por Kary Mullis1 y que
revolucionó la biología molecular y la forma en cómo
se estudiaban los ácidos nucleicos en ese momento.
Actualmente sabemos que la misión de la PCR
es copiar millones de veces una secuencia específica de ADN blanco mediante una poderosa catálisis
llevada a cabo por una enzima conocida como ADN
polimerasa, de tal manera que...
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