Pnt practica 13

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PNT Práctica 13

1. ¿Qué medio de cultivo debemos utilizar?


El medio de cultivo mas adecuado para hacer un antibiograma es Mueller-Hinton, pero debido a que es un medio muy caro y nodisponemos de el vamos a realizarlo con PCA.


2. ¿Qué microorganismo vamos a estudiar?


El microorganismo que vamos a estudiar es el staphylococcus aureus.


3. ¿Con queantibiótico vamos a trabajar?


Vamos ha realizar el antibiograma con amoxicilina, la concentración adecuada de amoxicilina es de 20/10µg.


4. Procedimiento a seguir:


▪ Disolverel antibiótico en un volumen adecuado “C0=gr/V” (madre).
Haremos 2 diluciones: 10-1 y 1/2.


▪ Taladrar 9 discos de papel de filtro para cada placa. ( autoclavar los discos)▪ Dosificar 1ml de cada disolución (madre, 10-1 y1/2) en cada ependorf, necesitamos 3 ependorf para cada disolución. ( 9 ependorf por placa).

▪ Dejar cada disco impregnado deantibiótico en cada ependorf durante 30 minutos.


▪ Preparar medio de cultivo PCA, “esterilizar” y plaquear.

▪ Revivificar las placas con staphylococcus aureus introduciendo la muestra en untubo de ensayo con 9ml de WP. Agitar 1min/1min y esperar 20 minutos para que crezca de forma adecuada.

▪ Sembrar 0,1ml en césped cuyo objetivo no es obtener colonias aisladas, sino conseguirque la placa quede llena de microorganismos. Dejar secar durante unos 10 min.

▪ Limpiar unas pinzas con algodón y alcohol, coger los discos impregnados del antibiótico (escurriéndolos unpoco) y colocar cada disco en su posición, 1,2,3 (madre), 4,5,6(10-1 ) 7,8,9 (1/2).

















▪ Levar las placas a la estufa de 31oC.

▪ A las 24-48 horas medirel halo de inhibición del antibiótico.



5. Posibles mejoras:


▪ Se podría mejorar el ensayo estudiando un antibiótico para varios microorganismos y/o un microorganismo para cada...
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