Pràctica adn

PRÀCTICA AL LABORATORI

EXTRACCIÓ DE L'ADN D'UN PLÀTAN

Objectiu:

Com que l'ADN es troba a totes les cèl·lules dels éssers vius incloent vegetals intentarem obtenir i observar una mostra d'ADNextreta d'un plàtan. Cal que separem suaument l'ADN de les substàncies no desitjades que es troben a les cèl·lules i evitar que l'ADN es trenqui.

Materials:

1 Plàtan
Sal
Detergentlíquid
Suc de pinya
Alcohol etílic al 96%
Minipimer
Aigua freda
Embut
Gassa
Vareta de vidre
Gradeta
Tubs d'assaig
Palet de fusta
Blau de metilèPortaobjectes
Comptagotes
Cobreobjectes
Microscopi òptic
Vas de precipitats

*els materials s'han de trobar a baixa temperatura (nevera)

Procediment:

Partir el plàtan en trossos iposar-lo en un vas de precipitats.
Afegir una tassa d'aigua freda (aproximadament el doble que la mostra de plàtans) i un pessic de sal.
Triturar el contingut del vas de precipitats amb l'ajudad'una minipimer a gran velocitat durant uns 15 segons.
Filtrar la sopa amb un embut i una gassa per separar les partícules de mida gran.
Afegir unes dues cullerades soperes de detergent líquidi barrejar-ho tot sense fer escuma amb una vareta de vidre i deixar-ho reposar de 5 a 10 minuts.
Repartir el contingut en tubs d'assaig, omplint-los 1/3 part.
Afegir una mica d'enzim (suc depinya) a cada tub i barrejar-ho suaument per no trencar l'ADN.
Inclinar el tub d'assaig i afegir-hi alcohol molt fred, a poc a poc, fent que regalimi per les parets del tub i formi una capa sobrela preparació de plàtans. Cal afegir la mateixa quantitat d'alcohol que de preparació.
Agafar un palet de fusta i extreure la mostra d'ADN que s'ha obtingut (massa blanquinosa que va pujant fins al'alcohol).
Col·locar una de les mostres d'ADN sobre un portaobjectes i tenyir-la amb una gota de blau de metilè (1 minut), rentar i tapar-la amb un cobreobjectes.
Col·locar l'altra...