Practica 1 y 2 de microbiologia general

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PREPARACION DE MATERIAL DE LABORATORIO Y MEDIOS DE CULTIVO PARA ESTERILIZACION.

Jazmín, Martínez Duran Gabriela, Pantiga Trejo María del Pilar.

Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa.

En esta practica se prepararon una solución salina fisiológica y dos medios de cultivo el de Infusión de cerebro y corazón (BHI) y el de Agar Infusión cerebro-corazón (Agar BHI), estaspreparaciones se distribuyeron en tubos con tapón de rosca, para posteriormente pasarlos a la autoclave.

Posteriormente se realizo la preparación de material de vidrio para esterilización que básicamente se ocuparon 3 tipos: Pipetas, Cajas de petri y Matraces. Al concluir este la envoltura del material se coloco en la autoclave a 15libras de presión (121ºC) por 15 minutos.

• Esterilización• Medio de cultivo.

• Autoclave

INTRODUCCION

La esterilización es el proceso de eliminación de toda forma de vida, incluidas las esporas. Es un término absoluto que implica pérdida de la viabilidad o eliminación de todos los microorganismos contenidos en un objeto o sustancia, acondicionado de tal modo que impida su posterior contaminación.
Se tratade un término probabilístico, de modo que tras un adecuado proceso de esterilización, se debe llegar a una probabilidad de encontrar microorganismos igual o menor que una unidad contaminada en un millón de unidades sometidas a un proceso de esterilización.

Objetivo: El alumno aprenderá a preparar el material de vidrio, instrumental de laboratorio y medios de cultivo para su esterilización.PREPARACION DE MATERIAL DE LABORATORIO Y MEDIOS DE CULTIVO PARA ESTERILIZACION

Material y reactivos

– 10 Tubos de 15X100mm con tapón de rosca.
– 5 Tubos de ensayo de 16X150mm.
– Una canastilla o un bote de lámina.
– Solución de Benzal 1:1000.
– 3 Matraces Erlenmeyer
– 1 Tijeras y pinzas.
– 8 Pipetas de 2ml
– 5 Pipetas de 5 ml.
– 2 Pipetas Pasteur.
– 8 Cajas de Petri.
–1 Gradilla.

Material y medio de cultivo:

- Infusión de Cerebro y Corazón.

– Agar Bacteriológico.
– Cloruro de sodio.
– Incubadora con termostato.
– Horno.
– Papel para envoltura.
– Papel Aluminio.
– Autoclave.

Desarrollo:

PREPARACION DE SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO

1.- en un matraz se preparan 50 ml de solución salina fisiológica (0.85%), se colocan 4.5 ml en cadatubo de una serie de 10 tubos dispuestos en una gradilla y se cubre con tapones de rosca.

Los tubos deberán estar debidamente rotulados, protegidos con una cubierta de papel y colocados en un recipiente.

2.- En un matraz Erlenmeyer se preparan 25 ml de infusión de cerebro y corazón, se distribuyen en 5 tubos de 15X100mm con tapón de rosca, se colocan en un recipiente y se cubren conpapel.

3.- En un matraz de 150 ml se preparan 50 ml de Agar infusión de cerebro corazón (Agar BHI), se cubre la boca del matraz con un tapón de algodón y gasa y se coloca sobre el tapón una cubierta de papel.

AGAR INFUSION CEREBRO CORAZÒN (Agar BHI)

Medio solido, rico en nutrientes.

Formula aprox. Gramos por litro:

Infusión de cerebro de ternera…….. 200.0

Infusión de corazón deres…………... 250.0

Mezcla de peptonas……………………. 10.0

Fosfato dipotásico……………………... 2.5

Cloruro de sodio ………………………. 5.0

Dextrosa……………………………….... 2.0

Agar……………………………………….. 15.0

pH final 7.3- 0.2

Para su preparación se requiere 37 gramos por 1000 ml.

PREPARACION DE MATERIAL DE VIDRIO PARA ESTERILIZACION

1.- Pipetas

En la boquilla de la pipeta se colocaun tapón de algodón de 1.5 cm de largo, de tal forma que el aire pase libremente a través del algodón; flamear el algodón que sale de la boquilla y envolver cada pipeta con papel en forma indicada en el esquema, evitando así el contacto con el medio externo después de haber sido esterilizadas, pero que sea de fácil y rápido acceso para su utilización.

Marcar con una flecha que indique el...
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