Practica De Microbiología
Páginas: 19 (4568 palabras)
Publicado: 28 de octubre de 2012
Universidad Politécnica
De Puebla
Ingeniería en Biotecnología
Microbiología General
4to cuatrimestre 4Bc
Practica 1:
Aislamiento e identificación de hongos
Introducción.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y sesolidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuación.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono,suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
También se añaden colorantes que actúan comoindicadores para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-positivas).
El trabajo de laboratorio es de suma importancia, ya que ahídonde se efectúa la identificación del agente causal, lo que permite la posibilidad de aplicar los métodos de control más adecuados.
El proceso de identificación de un patógeno requiere el aislamiento del mismo, para lo que es necesaria la elaboración de medios de cultivo que permitan el desarrollo de dicho patógeno.
Los postulados de Koch son los siguientes.
1.- El agente causal debeestar constantemente asociado con la enfermedad.
2.- El organismo debe ser aislado y cultivado en el cultivo puro.
3.- Al inocular una planta susceptible sana, debe desarrollarse la enfermedad original.
4.- El organismo patógeno debe ser aislado de la planta infectada bajo condiciones experimentales.
Aislamiento.
En la naturaleza abundan los microorganismos que se desarrollanestrechamente relacionados entre sí, de manera que encontramos bacterias, hongos y otros organismos de muy diversos tipos, tanto de vida libre como parásitos. Para poder estudiarlos y conocerlos se deben cultivar en modos adecuados y aislándolos del suelo o de partes vegetales enfermas. A partir de la primera muestra que se coloca en un medio de cultivo, se obtiene un cultivo mixto, del que sedeben tomar nuevas muestras para realizar otros cultivos seleccionados de las diferentes colonias, hasta lograr que en el medio solo se desarrollen un tipo de organismo, éstos es, un CULTIVO PURO.
Para realizar aislamientos a partir del suelo, existen diversas técnicas como el de Placa Directa y el de Dilución en Serie.
En el caso de que el patógeno se encuentre en las partes vegetales sepuede proceder a realizar aislamientos directos, utilizar cámaras húmedas, colocar partes vegetales en el medio de cultivo, a través de trampas, etc.
Medios de cultivo.
Los medios de cultivos son mezclas de sustancias nutritivas que se utilizan para el aislamiento, determinación, desarrollo, reproducción y diagnóstico de aquellos organismos productores de enfermedades en las plantas,que se comportan como parásitos facultativos.
Para lograr el desarrollo y producción de las diferentes especies fitopatógenas, los medios de cultivos deben reunir características especiales, tomando en cuenta los factores que se mencionan a continuación.
Nutrientes: en el medio de cultivo, deberán estar presentes elementos nutricionales tales como fuentes de carbono, nitrógenos,...
De Puebla
Ingeniería en Biotecnología
Microbiología General
4to cuatrimestre 4Bc
Practica 1:
Aislamiento e identificación de hongos
Introducción.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y sesolidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuación.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono,suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
También se añaden colorantes que actúan comoindicadores para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH básico y amarillo en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram-positivas).
El trabajo de laboratorio es de suma importancia, ya que ahídonde se efectúa la identificación del agente causal, lo que permite la posibilidad de aplicar los métodos de control más adecuados.
El proceso de identificación de un patógeno requiere el aislamiento del mismo, para lo que es necesaria la elaboración de medios de cultivo que permitan el desarrollo de dicho patógeno.
Los postulados de Koch son los siguientes.
1.- El agente causal debeestar constantemente asociado con la enfermedad.
2.- El organismo debe ser aislado y cultivado en el cultivo puro.
3.- Al inocular una planta susceptible sana, debe desarrollarse la enfermedad original.
4.- El organismo patógeno debe ser aislado de la planta infectada bajo condiciones experimentales.
Aislamiento.
En la naturaleza abundan los microorganismos que se desarrollanestrechamente relacionados entre sí, de manera que encontramos bacterias, hongos y otros organismos de muy diversos tipos, tanto de vida libre como parásitos. Para poder estudiarlos y conocerlos se deben cultivar en modos adecuados y aislándolos del suelo o de partes vegetales enfermas. A partir de la primera muestra que se coloca en un medio de cultivo, se obtiene un cultivo mixto, del que sedeben tomar nuevas muestras para realizar otros cultivos seleccionados de las diferentes colonias, hasta lograr que en el medio solo se desarrollen un tipo de organismo, éstos es, un CULTIVO PURO.
Para realizar aislamientos a partir del suelo, existen diversas técnicas como el de Placa Directa y el de Dilución en Serie.
En el caso de que el patógeno se encuentre en las partes vegetales sepuede proceder a realizar aislamientos directos, utilizar cámaras húmedas, colocar partes vegetales en el medio de cultivo, a través de trampas, etc.
Medios de cultivo.
Los medios de cultivos son mezclas de sustancias nutritivas que se utilizan para el aislamiento, determinación, desarrollo, reproducción y diagnóstico de aquellos organismos productores de enfermedades en las plantas,que se comportan como parásitos facultativos.
Para lograr el desarrollo y producción de las diferentes especies fitopatógenas, los medios de cultivos deben reunir características especiales, tomando en cuenta los factores que se mencionan a continuación.
Nutrientes: en el medio de cultivo, deberán estar presentes elementos nutricionales tales como fuentes de carbono, nitrógenos,...
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