Practica de piruvato

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LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA Nº

PRODUCCIÓN DE PIRUVATO DURANTE LA FERMENTACIÓN

OBJETIVOS

1. determinar la presencia de piruvato mediante la fermentación de levadura.
2.observar la producción de piruvato, mediante cambios de color.

TEORÍA RELACIONADA

La producción de piruvato durante la fermentación se realiza por una serie de reacciones enzimáticas que involucranalgunos intermediarios. Este proceso se conoce como fermentación o glucólisis.

La reacción total podría considerarse como la transferencia de dos pares de átomos de hidrógeno de la glucosa alNAD+. Los metabolitos de piruvato y acetaldehído se encuentran normalmente en bajas concentraciones, por lo tanto para comprobar su existencia es necesario impedir su transformación.

La piruvatodescarboxilasa no es activa en soluciones ligeramente alcalinas, de manera que el piruvato se acumula y su presencia se demuestra con la 2,4- dinitrofenilhidracina.

MATERIALESREACTIVOS

Tubos de ensayo ( 4 ) solución de glucosa 10%
Tubos de centrífuga (2) levadura ( TRAER).
Beaker de 400mlFosfato de sodio dibásico 0,5 M
Pipetas de 5ml ( 3 ) Fosfato de potasio monobásico 0,5 M
BalanzaÁcido tricloroacético 10%
Calentador 2,4-dinitrofenilhidracina saturado en HCl 2M
Pinzas para tubo de ensayo ( 2 )NaOH 10%
Termómetro.
Espátula

PROCEDIMIENTO

En dos tubos de ensayo A y B añada respectivamente 2.5 ml de solución de glucosa al 10%. Al tubo A agregue 2.5ml de suspensión de levadura al10% P/V en solución de fosfato de sodio dibásico 0,5 M; al tubo B agregue 2.5ml de suspensión de levadura al 10% P/V en solución de fosfato de potasio monobásico 0,5M.

Coloque en baño de maría a...
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