practica de sintesis organica
EXPERIMENT 6
REDUCCION DE VAINILLA MEDIADA POR LEVADURA ENANTIOESPECIFICA
Introducción
Nos interesa desarrollar metodologías para obtener productos enantiomericamente puros ya que los productosópticamente activos con actividad biológica responden a una configuración absoluta determinada.
Las transformaciones enzimáticas y microbianas como la levadura destacan por su altaestereoselectividad, en este experimento reduciremos la vainilla (grupo aldehído) a alcohol vainillico utilizando; una suspensión de levadura (catálisis de la enzima aldehído deshidrogenasa que utiliza NADH H+) y porotro lado a través un reductor inorgánico como NaBH4.
Demostraremos la eficiencia enantioespecifica mediante metodos de NMR
Procedimiento experimental
Reducción de la vainilla en D2O
Añadir 100ml de de óxido de deuterio 99,8 % en un matraz Erlenmeyer de 250 ml, sacarosa (azúcar de mesa, 10 g), vainillina (0,20 g) y una mosca magnética recubierta de teflón para agitar hasta disolver lavainillina, a continuación, añadir la levadura de Fleischmann "seca activa " (7 g, un paquete). Tapar sin apretar el frasco con un trozo de algodón, y agitar la suspensión a temperatura ambiente durante16 h. En ese momento agregar más levadura (aproximadamente 3,5 g) y continuar agitando durante otras 24 h.
Centrifugar el caldo de fermentación a 2000 rpm durante 10 min, a continuación, extraer elliquido sobrenadante con 100 ml de éter tres veces. Mezclar los extractos de éter y secar con sulfato de sodio, después concentrar en un matraz tarado usando un rotavapor. Disolver en 1 ml CH2Cl2 elresiduo oleoso, a continuación, eliminar el disolvente con una corriente suave de nitrógeno. Un producto cristalino blanco se mantendrá. Lavar los cristales con una solución de 20% de acetato de etilo:80% éter de petróleo (30-60°, 2 ml). Se elimina el disolvente con una pipeta Pasteur y dejar el producto secar durante la noche.
Reducción de la vainilla con NaBD4
Disolver vainillina (152 mg) en...
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