Practica laboratorio enzimas

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  • Publicado : 6 de marzo de 2012
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AUTORES:
* Cristian Camilo Gómez Ramírez 31110009
* Oscar Jair Barrera Fonseca 31110028
TITULO:
Practica de laboratorio de enzimas y cinética enzimática
OBJETIVOS:
En esta práctica se busco determinar la actividad de la enzima presente en la saliva, alfa amilasa que ayuda en diferentes reacciones, para que es importante y el tipo de enzima que esta realiza, además decompararla con diferentes tipos de hidrólisis que son llevados a cabo por diferentes enzimas.
También de la misma manera se pretendió determinar si, en algunos de los tejidos vegetales se encuentran otros tipos de enzimas su función para que la planta los utiliza, además de una determinación de con que clase de enzima se esta trabajando. Además de establecer los diferentes resultados quepueden ocurrir con diferentes reacciones producidas por las diferentes enzimas que podemos encontrar en los tejidos y sus productos.

INTRODUCCION
Las enzimas son moléculas que catalizad diferentes reacciones bioquímicas, son encargadas de que una reacción química gracias a la energía que es producía por “la energía libre de gibs” haciendo que el resultado de esta reacción sea de una manera masbaja, aunque también en ocasiones de aumentar la velocidad de reacción dependiendo del tipo de enzima con la que se este trabajando. Estas moléculas actúan sobre una gran diversidad de elementos también llamados sustratos, los cuales en la reacción producida el sustrato es convertido en un elemento diferente denominado producto. Son muy importantes a nivel biológico debido a que casi todos losprocesos que son llevados en el metabolismo se requieren diferentes reacciones enzimáticas.
Las enzimas funcionan como un catalizador biológico disminuyendo la energía de activación y al igual que la mayoría de los catalizadores no se consumen por las reacciones que se realizan ni alterar su equilibrio químico. Pero se diferencian de los demás catalizadores en que son muchos mas específicos enreaccione metabolicas.
La cinetica enzimática es el estudio de cómo las enzimas se unen a sus sustratos y los transforman en productos . las enzimas se caracterizan por catalizar millones de reacciones por segundo, dependiendo de condiciones de solución y concentración de sustrato. Existen diferentes factores que pueden hacer variar la actividad enzimática como por ejemplo; temperaturas elevadas, pHextremos pueden dificultar la actividad enzimática, mientras que mayores concentraciones de sustrato tienden a aumentar la actividad. Cada reacción esta dada por una velocidad máxima de reacción donde se añade gran cantidad de sustrato para hallar la taza de formación de producto que esta brindado por una curva de saturación enzimática, donde seguirá produciendo el producto pero ya es mas constantey no va a fructuar como lo hace cuando encuentra su velocidad máxima debido a que todos los sitios activos de dicha enzima se encuentran unidos un sustrato.

MATERIALES Y METODOLOGIA
se separaron 8 tubos de ensayo en donde se le adicionaron diferentes cantidades de saliva, almidon, HCL y agua representados en la siguiente tabla
tabla 1 cantidad de reactivos adicionados a los 8 diferentes tubosde ensayo para determinar la accion de la amilasa salival
| TUBO 1 | TUBO 2 | TUBO 3 | TUBO 4 | TUBO 5 | TUBO 6 | TUBO 7 | TUBO 8 |
Almidón | 5ml | 5ml | 5ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 5ml |
Agua | 0 | 0 | 0 | 3 mL | 3 mL | 3ml | 3ml | 0 |
Saliva | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 0 | 0 |
HCl 0,1M | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2ml | 2ml |

Seguido a esto los tubos se ponían en aguatibia a 37 grados centígrados y se retiraban los tubos de un tiempo determinado los tubos 1 y 4 ( 5 minutos), 2,5,7 y 8 (10 min), 3 y 6 (20 min). Seguido a retirarlos se separaba cada tubo en la mitad de solución que tenia, para asi quedar con 2 tubos secundarios de la misma muestra para adicionarle a un tubo de ensayo prueba de benedict y seguidamente se debía calentar a 37 grados durante 5...
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