Preparacion De Laminas Histologica

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD ZOOTECNIA
MEDICINA VETERINARIA
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD ZOOTECNIA
MEDICINA VETERINARIA



marianela medina
CICLO: II
2012
PIURA _PERU
CICLO: III
2012
PIURA _PERU
PREPARACIÓN DE LÁMINAS HISTOLÓGICAS
CURSO: HISTOLOGÍA
PREPARACIÓN DE LÁMINAS HISTOLÓGICAS
DOCENTE: ISABEL CHOQUEHUNCA
CURSO: HISTOLOGÍAIntroducción
La Técnica Histológica abarca varios procedimientos a los que se somete un tejido para proporcionar los cortes como se conocen, montados bajo un cubre objeto con imágenes de estructuras contrastadas, para su estudio bajo microscopía óptica o electrónica. Para la obtención de cortes para observar a microscopio, hay que seguir un protocolo en el que se incluye la obtención de la muestra, su cortey montaje. Para empezar con la técnica histológica se debe obtener una muestra del tejido. Fijación: Este proceso se refiere al tratamiento del tejido con sustancias químicas, de manera que mantenemos las células con las propiedades intactas lo mejor posible. Esto se logra al inactivar ciertas enzimas celulares que de otra manera iniciarían la autolisis y llevarían a la DEGENERACIÓN POST MORTEM.La fijación mantiene las estructuras al estimular la formación de enlaces cruzados entre las proteínas.

Materiales:
1. Mandil
2. Laminillas
3. Alcohol al 100% (absoluto)
4. Cassette para muestra
5. Muestra (tejido)
6. Micrótomo

7. Parafina
8. Xilol
9. Eosina
10. BañoMaría
11. Termometro

12. Dispensador de parafina
13. Mezclador parafina

Procedimiento

1. Inicialmente: Se necesita una muestra, para lo que se realizara una bioxia. Se coloca dentro del frasco para muestra en formol al 10% (24 horas) pasada las 24 hrs. Cortar un cuadrado de 1.5 cm X 1.5 cm ( respecto al área) y 0.5 cm (respecto al espesor).
2. Debe seguir un proceso dedeshidratación, se coloca en el cassette consiste en dejar en alcohol al 100% ( Puede estar mas de 2 horas)
Proceso de desitratacion

OH 50%_OH70%_OH95%_OH 100%

3. Lo que sigue es la inclusión, lo que consiste en colocare la muestra en el molde y después se le aplica la parafina, después se le coloca el mismo cassette de donde se le saco. Se espera que se seque y enfrié y luego que sehace el desmontaje de la muestra.
4. Una vez que se obtiene el tejido con el que se comienza a realizar los cortes
5. El micrótomo tiene una palanca, donde tiene un cabezal que sube y baja su navaja y su manija hacia adelante y hacia atrás.
6. Esa muestra es llevada a baño maría a 37° C, esta derrite la parafina que se encuentra y permite que el tejido que esta enrollado se estire.Ingreso el porta objeto (a manera de pesca) y saco una de las muestras se le agrega una solución a base de albumina que me permite que este permanezca pegada a la muestra, para después iniciar la coloración.
7. Se limpia la muestra con el cilel, para sacar algunos rastos de parafina y después de ello se inicia con la coloración. Se le puede agregar esmalte encima de la muestra para mayor fijación.. PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA BÁSICA
* 2. Toma de MaterialLos métodos más utilizados son:• Biopsias• Necropsias• Improntas• Frotis de células superficiales• Frotis de células sanguíneas• Animales de experimentación• Aplastados celulares
* 3. Fijación• La fijación debe realizarse lo más rápido posible luego de tomada la muestra, para evitar los procesos de autolisis. Además sedebe escoger el método más adecuado al objetivo del estudio a realizar.• Se pueden clasificar en los siguientes métodos: Por inmersión: pequeños trozos del tejido son sumergidos en el liquido fijador. Por perfusión: el líquido fijador se aplica por inyección vascular. Por vapores: consiste en utilizar líquidos fijadores que emitan vapores, se debe realizar bajo campana extractora de gases....