Preparación y siembra de medio de cultivo

“Año de la promoción de la industria responsable y del compromiso climático”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE UCAYALI
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL






IMFORME Nº 03
PREPARACIÓN Y SIEMBRA EN MEDIOS DE CULTIVO

PRESENTADO POR:
FLORES PALOMINO, GIOVANA ESTHER

ASIGNATURA DE:
MICROBIOLOGÍA GENERAL

PUCALLPA – PERÚ
2014I. TÍTULO: PREPARACIÓN Y SIEMBRA DE CULTIVOS


II. INTRODUCCIÓN

Para estudiar las características de los microorganismos (forma, estructura, tamaño, consistencia, cromogenesis y otros), es necesario sembrarlos y cultivarlos en medios de cultivos apropiados según el tipo de microorganismo, de tal forma que proporcione los nutrientes necesarios para su crecimiento y desarrollo. La siembrade microorganismos se realiza en medios sólidos y líquidos.
La mayoría de las bacterias son de rápida multiplicación y agotan los nutrientes de los medios de cultivos en forma acelerada. Las mismas una vez sembrada en los medios de cultivos deben incubarse a una temperatura óptima de crecimiento y al abrigo de la luz.

III. OBJETIVOS

Aprender a inocular distintos medios de cultivocontenidos en placas Petri: agar nutritivo y agar Mac Conkey.
Observar el crecimiento bacteriano en los distintos medios de cultivo.

IV. REVISIÓN DE LITERATURA

Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inoculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba auna temperatura adecuada para el crecimiento.
Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:
Que se efectúen asépticamente.
Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados.
Que se realicen solo los manipuleos indispensables.
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un mechero o bien Flujo laminar.




Existendiferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los requerimientos del microorganismo a estudiar.
MEDIOS SÓLIDOS
Siembra por inmersión
Se coloca el inoculo en una placa o caja de Petri y sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se utiliza para microorganismos aerobios.
Siembra en doble capa
Se procede de la misma manera que por inmersión. Una vezsolidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir la capa anterior. Este método se utiliza para microorganismos anaerobios facultativos y microaerofílicos.
Siembra en superficie
Se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inóculo. Con ayuda de una espátula de Drigalsky se extiende elinóculo hasta su absorción total por el medio de cultivo. Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos.
Siembra en estría
Se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido y se deja solidificar.
Existen distintas técnicas para la siembra en estrías, el objeto es obtener colonias aisladas
Técnica A: Consiste en cargar el ansa con la muestra y hacer estríasparalelas en la cuarta parte de la superficie de la placa, se quema el ansa, se enfría, se gira la placa a 90° y se vuelve a estriar tocando 3 o 4 veces el área sembrada inicialmente y cubriendo otro cuarto de la placa. Por último, sin quemar el ansa, se estría el resto de la superficie sin sembrar.
Técnica B: Con el ansa cargada se hacen 3 o 4 estrías; se quema el ansa, se hacen 3 o 4 estríasperpendiculares a las anteriores, se quema el ansa y se repite el procedimiento hasta agotar la superficie de la placa Siembra en agar en tubo inclinado o bisel: en este caso se colocan 5 ml de medio de cultivo fundido y estéril, se inclina el tubo y se deja enfriar.
El inóculo se siembra, con ayuda de ansa, de la siguiente manera:
En profundidad con ansa de punta
Se pica con el ansa el...