Pruebas Bioquímicas

PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Las pruebas bioquímicas observan los niveles de substancias y enzimas específicas que son producidas por reacciones químicas en el cuerpo.
 
Los desórdenes metabólicos con frecuencia son el resultado de una enzima que falta o que no funciona. Cuando falta una enzima, o cuando ésta se presenta en cantidad reducida, o no funciona correctamente, el cuerpo no puede desempeñarsus reacciones químicas usuales. Como resultado, pueden ocurrir varios cambios dañinos en la bioquímica del cuerpo. Estas incluyen la acumulación de substratos, la acumulación de precursores, deficiencia de productos, y el redireccionamiento de substratos a vías alternas.
 
Las pruebas bioquímicas observan los niveles de estos desordenes y pueden ser utilizadas para detectar varias condicionesmetabólicas diferentes.

MICROORGANISMO | FAMILIA | TINCION | FORMA | MOVILIDAD |
PSEUDOMONA SPP. | ENTEROBACTER | GRAM - | BACILOS CORTOS, CURVADOS O RECTOS | POSEE FLAGELOS POLARES |
SALMONELLA | ENTEROBACTER | GRAM - | BACILOS CORTOS | FLAGELOS PERÍTRICOS |
SHIGUELLA SPP. | ENTEROBACTER | GRAM - | BASTONCILLOS | NO TIENE |
ESCHERICHIA COLI | ENTEROBACTER | GRAM - | BACILOS CORTOS NOESPORULADOS | FLAGELOS PERÍTRICOS |
STAPHYLOCOCCUS AUREUS | MICROCACEAE | GRAM + | COCACEA | NO TIENE |

 PRUEBA TSI (TRIPLE SUGAR IRON Ó TRIPLE AZÚCAR HIERRO)
El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad de producción de ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un único medio. Tambien permite la identificación de la producción de SH2. Esta esuna prueba específica para la identificación a nivel de género en la familia Enterobacteriaceae, con objetivo de diferenciar entre:
* bacterias fermentadoras de la glucosa
* bacterias fermentadoras de la lactosa
* bacterias fermentadoras de sacarosa
* bacterias aerogénicas
* bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgánicas que contengan azufre.
Prodedimiento:Inocular los tubos de TSI con punta (alambre recto). Para eso introducir la punta hasta 3 a 5 mm. del fondo del tubo. Tras retirar el alambre del fondo, estriar el pico con un movimiento hacia uno y otro lado. Incubar a 35° durante 24 horas. Posteriormente se debe medir el pH de los cultivos.
Resultados:
* Pico alcalino/fondo alcalino : no hay fermentación de azucares. Característica de bactriasno fermentadoras como Pseudomonas sp.
* Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada,lactosa ni sacarosa fermentadas. Shigella spp.
* Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada, ni lactosa ni sacarosa fermentadas, producción de ácido sulfhídrico. Salmonela spp.
* Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa fermentadas. Puede producirse SH2 o no. Escherichia coli.* A estos resultados se les agrega el resultado de la producción de gas.
MICROORGANISMO(S)DETECTADO(S) | GRUPO 1 | GRUPO 2 | GRUPO 3 | GRUPO 4 |
SALMONELLA | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADASPRODUCCIONDE ACIDO SULFHIDRICO | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADASPRODUCCIONDE ACIDO SULFHIDRICO | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADASPRODUCCIONDE ACIDOSULFHIDRICO | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADASPRODUCCIONDE ACIDO SULFHIDRICO |
SHIGUELLA SPP. | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADAS | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADAS | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADAS | GLUCOSA FERMENTADALACTOSA NI SACAROSAFERMENTADAS |
PRUEBA LIA (LYSINE IRON AGAR Ó AGAR LISINA HIERRO)
Esta prueba permite diferenciar losmicroorganimos que producen descarboxilación o desaminación de la lisina. Se pude detectar ademas la produccion de SH2 y es más sensible que el TSI para la detección de SH2. Es muy utilizado par descartar Salmonella de aislamientos primaros.
Procedimiento: Inocular en forma de estría las cepas de micro organimos en el medio de cultivo e incubar por 24 horas a 37° .
Interpretación y Resultados:...