Quimica Lcp Llo Bio
Serena
LABORATORIO DE
BIOLOGÍA: OBTENCIÓN
CASERA DE ADN
Vania González Pujado.
14
Tamara Guzman Gallardo.
15
Natalia Hernández Antezana. 16
Catalina Miranda Somerville
19
Biología
Profesor. Leandro Olivares
ÍNDICE
Objetivo
Introducción
Materiales y reactivos
Procedimiento
Hipótesis y variables
Resultado
¿Cuál es la acción del detergente sobre lacélula?
¿Por qué es importante no usa agua potable?
¿Cual es la importancia de mantener la temperatura baja durante el proceso de obtención
de ADN?
¿Por qué el alcohol solo precipita las fibras de ADN y ARN y no otros macromoléculas
presentes?
¿ De que color es el ADN?
¿Qué observación puede hace respecto del trabajo practico?
Conclusión
Bibliografía
OBJETIVOS:
Este trabajo loque busca es interiorizar al alumno en los
conceptos básicos del ADN y su importancia en la preservación y
transmisión de la información genética en los organismos vivos.
Adicionalmente se discutirán las propiedades del ADN y otras
macromoléculas presentes en las células y tejidos que nos
permitan llevar a cabo su separación. En ese contexto, durante
el desarrollo de este trabajo práctico elalumno desarrollará las
habilidades y destrezas de conocimiento, comprensión y análisis,
a través de la manipulación de muestras vegetales con la
finalidad de obtener ADN en un modo rudimentario y simple,
usando para ello elementos de uso doméstico.
INTRODUCCIÓN:
Nuestro trabajo constará en un experimento realizado
anteriormente con el fin de extraer el ADN de una célula
vegetal, en este caso eltomate. Pero antes, ¿qué es el
ADN? es la molécula que lleva la información genética
utilizada por una célula para la creación de proteínas;
está formado por ácido fosfórico, desoxirribosa y bases
nitrogenadas. Para lograr este objetivo se requiere
realizar una serie de etapas básicas, como romper la
pared celular y la membrana plasmática, luego se debe
romper la membrana nuclear y finalmente hayque
proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo;
estos son los pasos que explicaremos detalladamente a
continuación, además de una serie de preguntas con
sus respectivas respuestas y los resultados finales luego
de llevar a cabo el experimento.
MATERIALES Y REACTIVOS
Batidora.
Muestra vegetal.
Sal de mesa.
Agua destilada o mineral.
Colador.
Bicarbonato sódico.
Etanol.
Hielo.
Tubo de ensayo.
Varilla fina.
Vaso precipitado.
Gasa fina.
Pipetas.
Detergente líquido.
PROCEDIMIENTO:
Para preparar el tampón o lisis reúna los siguientes ingredientes y
mantenga en la nevera o en un baño de hielo triturado:
- 120 ml de agua, si es posible destilada.
- 1,5 g de sal de mesa.
- 5 g de sal de mesa.
- 5 mL de detergente líquido o shampoo.
Adicionar 10 mL de etanol aun tubo de ensayo y dejar en el baño
de hielo triturado.
Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN (tomate, cebolla o
ajo) y cortarla en cuadritos.
Triturar la mezcla con un poco de agua destilada en la batidora
accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así romperá
muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del
detergente.
PROCEDIMIENTO
Mezclar en unrecipiente de 5 mL del triturador celular con 10 mL del
tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos.
Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular
haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Para ello ocupe
las gasas fina sobre el colador parra retener aún más los vegetales.
Retirar 5 mL de caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con
pipeta 10mL de alcohol (etanol) enfriado a
0°C. Se debe dejar
escurrir lentamente el alcohol quedará flotando sobre el tampón.
Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la
separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia
delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos
de mayor tamaño de ADN. Pasado a un minuto retirar la varilla...
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