Quimica

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Í NDICE | Paginas |
1.-Rojo de metilo | 2 |
2.-Voges Proskauer | 4 |
3.-Citrato de Simmons | 6 |
4.-Hidrólisis del almidón | 8 |
5.-TSI (agar triple azúcar) | 10 |
6.-Agar Kliger (KIA) | 10 |
7.-Agar Urea de Kristensen | 13 |
8.-LIA (decarboxilación de lisina, ornitina y arginina) | 15 |
9.-Prueba de FAD (fenilalalina desaminasa) | 17 |
10.-Proteólisis de gelatina | 19 |11.-Proteólisis de la leche (agar leche para ver hemólisis de la caseína) | 21 |
12.-Oxidasa | 23 |
13.-Catalasa | 25 |
14.-Pueba Indol | 27 |
15.-Reducción de nitratos | 29 |
16.-MIO | 31 |

PRUEBA ROJO DE METILO

a) Principio de la prueba

A. Probar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos finales ácidos a partir de la fermentación de laglucosa y para vencer la capacidad buffer del sistema

B. Ésta es una prueba cuantitativa para la producción de ácido (determinación de pH); algunos microorganismos producen más ácidos que otros.

b) Objetivo de la prueba

Identificación de especies bacterianas que producen ácidos fuertes a partir de la glucosa.

A. Ayudar a la diferenciación entre géneros o a la diferenciación deespecies dentro de un género de la familia Enterobacteriaceae. La prueba de rojo de metilo es parte de la batería de pruebas del IMViC (indol-rojo de metilo-Voges-Proskauer-citrato).
1. Escherichia coli (MR+) de Enretobacter aerogenes (MR-) y Enterobacter cloacae (MR-).
2. Especies de Yersinia (V, variable por lo común +) de otros bacilos gramnegativos no entéricos (MR-).
3. Diferenciar Edwardsiellaictaluri (MR-) de E. hoshinae (MR+) y E. tarda del biogrupo 1 (MR+).
4. Diferenciar Leminorella richardii (MR-) de L.grimontii (MR+)
5. Diferenciar Klebsiella oxytoca y K.pneumoniae subesp. Pneumoniae (ambas V, por lo común MR-) y L.terrigena (V) de otras especies o subespecies de Klebsiella (MR+)
6. Budvicia aquatica (MR+) de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae con resultadosKIA/TSI Ácido/Ácido, HS2.

B. Otros microorganismos que son rojo de metilo positivos.
1. Aerococcus urinae (MR+) de A.viridans (MR-)
2. Todas las especies de Shigella (MR+)
3. Ewingella americana (MR+)
4. Especies de Kluyvera (MR+)
5. Leclercia adecarboxylata (MR+)
6. Especies de Citrobacter (MR+)
7. Buttiauxella agrestis (MR+)

C. Las pruebas de rojo de metilo y Voges-Proskauer seutilizan para ayudar en la identificación de
1. Aeromonas hydrophila (MR+/VP+)
2. Aeromonas salmonicida subesp. masoucida (MR+/VP+)
3. Aeromonas veronni (MR+/VP+)
4. Especies de Listeria (MR+/VP+)
5. Vibrio metschnikovii (MR+/VP+)

c) Reacción química o base bioquímica

La prueba rojo de metilo (MR) es una prueba cuantitativa basada en el uso de un indicador de pH, el rojo de metilo, paradeterminar la concentración de ión hidrógeno (pH) cuando un microorganismo fermenta la glucosa. La concentración de ión hidrógeno depende de la relación de gases (CO2 y H2), lo que a su vez es un índice de las diferentes vías metabólicas de la glucosa exhibidas por los diversos microorganismos. Los diferentes patrones de fermentación se deben a las variaciones en las enzimas relacionadas con elmetabolismo del ácido pirúvico en el microorganismo.
La reacción global del metabolismo de la glucosa por E.coli es:

La validez de la prueba de rojo de metilo depende de una incubación lo suficientemente prolongada para permitir que ocurra la diferencia en el metabolismo de la glucosa. Los microorganismos a ser probados deben ser incubados por los menos durante 2 días a 35-37ºC, lo que permite quetodos los microorganismos con relaciones bajas de gas (MR+) demuestren su concentración de ión hidrógeno limitante (pH terminal bajo), mientras que todos los que tienen relaciones altas de gas (MR-) mostrarán una concentración de ión hidrógeno (pH terminal alto).

d) Interpretación de resultados incluyendo imágenes

A. MR positivo (+): el cultivo es suficientemente ácido para permitir...
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