Quimico Biologo Clinico

Obtención de colesterol a partir de la yema de huevo
Objetivo:
Extraer el colesterol presente en la yema de huevo con solventes orgánicos
Determinar el colesterolpresente en la yema de huevo
Procedimiento
Obtención del colesterol:
1. Rompa el huevo, separe la yema y vacíela en un vaso de precipitado de 100 mL. La clara sedescarta.
2. Pese aproximadamente 10 g de yema (mitad de la yema) en un vaso de precipitado de 250 mL.
3. Agregue 40 mL de una mezcla acetona:éter (20:20) y agite conla varilla de vidrio por 10 minutos.
4. Transfiera el contenido a dos tubos de ensaye con rosca de 13 x 100 y centrifugue por 10 minutos
a 2500 rpm.
5. Elcolesterol se encuentra en la capa sobrenadante. Rotule un tubo de ensaye y adicione 0.5 mL
del sobrenadante proveniente de la extracción de la yema de huevo.
6. Evapore asequedad en un baño de agua termorregulado a 60°C.
Reacción de Liebermann-Burchard
1. Coloque en su gradilla el tubo de ensaye con la muestra evaporada y otro tubopara utilizar como
blanco.
2. Añada a los dos tubos 3.0 mL de cloroformo anhidro.
3. Añada 1.0 mL de anhídrido acético a cada uno de los tubos
4. Con mucho cuidadoagregue dos o tres gotas de ácido sulfúrico a cada uno de los tubos.
5. Agite suavemente y observe la aparición de color. Deje reposar y observe el color a los dos,cinco,
diez y veinte minutos, para notar algún cambio de color en la reacción
6. Anote todos sus resultados en la hoja de datos.
Datos experimentales obtenidos
Pesodel huevo entero:
Peso de la yema de huevo:
Resultado de la Reacción de Liebermann-Burchard
Tubo No.
Color
Tiempo
1
2
Dra. Abril Zoraida Graciano Verdugo