Realidad de la flor

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1. INTRODUCCION

1. objetivo:

❖ conocer los métodos de extracción de ADN

❖ aprender su procedimiento de cada uno de ellos

❖ elegir el método más propicio.

2. REVICION DE LITERATURA

Existen muchas técnicas de extracción de ADN como por ejemplo:

Ácido desoxirribonucleico o ADN (DNA) es la molécula que guarda el código genético de todas las células.Sin importar que el organismo sea multicelular o unicelular, eucariota o procariota, todos tienen el DNA como vehículo de su código genético.

electroforesis es una de las técnicas mas empleada en bioquímica y biología molecular, usada para separar y a veces purificar macromoléculas, especialmente proteínas y ácidos nucleídos, que difieren en tamaño, carga o conformación. Cuando las moléculascargadas son sometidas a un campo eléctrico, migran hacia el polo positivo (ánodo) como es el caso de los ácidos nucleicos o negativo (cátodo) de acuerdo a sus cargas.

Otra técnica para el análisis de ADN es reacción en cadena polimerasa.

Cultivo invitro : cultivo en un medio nutritivo en condiciones estériles de plantas , semillas órganos explantados tejidos , células yprotoplastos

Para medios sólidos agar (gelatina).

Extracción "casera" de ADN
(y comparación con el protocolo normalizado)
[pic]
La presente práctica se puede realizar perfectamente en una cocina normal de una casa. Es más, en un laboratorio de un centro de enseñanza media es frecuente que no se disponga de aparatos o reactivos necesarios para llevarla a cabo y que, por el contrario,siempre hay en una cocina (nevera con congelador, batidora, hielo, etc.)
MATERIAL Y REACTIVOS
|Muestra vegetal |Batidora |
|Agua (destilada o mineral) |Nevera |
|Sal de mesa |Colador o centrífuga |
|Bicarbonato sódico|Vaso |
|Detergente líquido o champú |Tubo de ensayo |
|Alcohol isoamílico a 0ºC |Varilla fina |

     FUNDAMENTO
La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN,permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN,de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele haber en una cocina.
     REALIZACIÓN
1. Preparar el tampón con los siguientes ingredientes y mantener enla nevera o en un baño de hielo triturado:
o 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
o 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
o 5 g de bicarbonato sódico.
o 5 ml de detergente líquido o champú.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo,tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.
4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar...
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