RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESOFILOS
MATERIALES Y REACTIVOS:
Gradillas
Tubos de ensayo tapa rosca
Bolsas plásticas estériles
Agua peptonada al 0.1% estéril.
Agar Plate Count
Cajas de petriestériles
Micropipeta de 100 y 1000 λ
Puntas amarillas y azules esteril
Mechero
EQUIPOS:
Incubadora a 35ºC +/- 2ºC.
PROCEDIMIENTO
Método de Recuento en Placa:
Mezclar muy bien la muestra (liquida)para asegurar su homogenización.
Desinfectar con alcohol al 75% el sitio por donde se vaya a extraer la muestra.
Abrir asépticamente (con el mechero en medio) y adecuadamente la muestra.
Medir 11mililitros en un recipiente estéril y añadir al recipiente de dilución que contiene 99 ml de agua peptonada para obtener la dilución de 101.
Mezclar al agitar vigorosamente el recipiente parahomogenizar.
Preparar la dilución 102 trasfiriendo 1 ml de la dilución 101 a un tubo de ensayo que contiene 9 ml de agua peptonada, agitar cuidadosamente.
Transferir por duplicado alícuotas de 1 ml decada una de las diluciones consecutivas en cajas de Petri estériles.
Verter en las cajas de petri, 15 ml de agar plate count fundido y mantenido a 45ºC.
Mezclar el inoculo con el medio de cultivofundido, no debe transcurrir más de 20 minutos entre la realización de las diluciones y el vertido del medio. La manera más indicada de mezclar el inoculo con el medio es la siguiente:

Mover la cajade arriba hacia abajo 5 veces
Rotar la caja cinco veces en el sentido de las agujas del reloj
Mover la caja 5 veces haciendo Angulo recto sobre el movimiento
Rotar la caja cinco veces en el sentidocontrario de las agujas del reloj.
Hacer control de esterilidad del medio de cultivo incubando una caja que contenga Agar Plate Count.
Una vez solidificado el medio de cultivo, invertir las placas eincubarlas a 35ºC +/- 2ºC durante 48 horas.
Realiza el cálculo e interpretación de los resultados.

Resultados
Aerobios mesofilos (agar Plate Count)
Dilución 10-1
Dilución 10-2
Control...