Reporte De Bioquimica/Deshidrogenasa Lactica

OBJETIVO

-El alumno aprenderá a observar e identificar algunas enzimas como la deshidrogenasa Láctica.
-Observar y conocer la reacción de la deshidrogenasa láctica.

INTRODUCCIÓN

Lactato deshidrogenasa: Es una enzima que cataliza la reducción reversible del Piruvato a lactato, utilizando la coenzima NADH como agente reductor. Algunos autores llaman esta reacción como la ultima de laglucolisis; y sucede cuando la cantidad de oxigeno es limitada, como en el musculo durante la actividad física. Esto la diferencia de otras formas fermentativas anaerobias del catabolismo de los carbohidratos. La forma enzimática más común tiene un peso molecular de 140,000 pero todas las de los vertebrados están formadas por tetrámeros, con cuatro sitios catalíticos independientes de cada tetrámero.CH3COCOO- + NADH + H+ --------------->CH3CH2OCOO- + NAD+
El lactato es el producto de la reacción, producida en condiciones anaerobias, difunde a través de la membrana plasmática para quedar en los alrededores como producto de desecho. El dolor ocasionado por la fatiga y el rigor de las fibras musculares se debe en gran parte a la acumulación de lactato en el musculo. En el hígado, ellactado es reconvertido a Piruvato gracias al lactato deshidrogenasa. Esta enzima es utilizada por los médicos para el diagnostico y seguimiento de un infarto de miocardio.

MATERIALES Y METODOS

REACTIVOS | MATERIAL |
* Azul de metileno al 0.02% | 1Gradilla |
* Lactato de Sodio al 5% | * 4 Tubos de ensaye |
Suspensión de levadura | * Mechero, Tripie, tela de asbesto |
Aceitemineral | * 1Baño de agua |
* | * 4 Pipetas 5mL |
* | 1Vaso de precipitados 250mL |
* | 1Vaso de precipitados500mL |
* | * 1Pinzas para tubo de ensaye |

PROCEDIMIENTO
1) Se coloco en la gradilla tres tubos de ensaye numerados del 1 al 3.
2) Agregamos 5mL de Azul de Metileno al 0.02% a cada uno de los tres tubos.
3) Se agregaron 10 gotas de Lactato de sodioal 5% a los tubos 1 y 2, y en un tubo de ensaye aparte, se tomaron 5mL de suspensión de levadura al 20% y se calentó en baño de agua hirviendo por 5min. (Fue agregada al tubo Numero 2).
5) Se agregaron 5mL. De suspensión de levadura sin calentar a los tubos 1 y 3.
6) Mezclamos bien, y cubrimos los tubos con una cápita de aceite mineral, inclinando los tubos y dejando que el aceite corriera porla pared del tubo lentamente.
7) Por ultimo colocamos los tubos en baño de agua a 37° C y observamos el resultado ocurrido a los 3, 6, 9, 12, y 15 minutos,
8) Anotamos observaciones.

RESULTADOS

* Deshidrogenasa Láctica
La reacción se dio lenta no se noto un cambio inmediato aproximadamente después de 15 minutos se noto un cambio en los tubos en algunos mas que en otros como se notaen la imagen.

Discusión De Resultados
* Deshidrogenasa Láctica
El tubo 1 esta reacción fue lenta ya que contenía desde un principio el producto (lactato de sodio).
El tubo 2 se considera negativo ya que el azul de metileno no se redujo ya que cuando se le agrego la levadura precalentada perdió su actividad enzimática.
El tubo 3 es positivo se puede notar por que el azul d metileno esreducido a blando con la acción de degradación de la levadura por la deshidrogenasa láctica

CONCLUSIÓN
Concluimos esta práctica satisfactoriamente ya que el objetivo dado lo realizamos correctamente, teniendo así el resultado obtenido. En la identificación de las enzimas catalasa (hecha en la sesión pasada) y deshidrogenasa láctica se pudo observar y conocer la reacción de cada una de ellas.Estas enzimas tienen algo en común; catalizan la transferencia de electrones desde una molécula donante (agente reductor) a otro aceptora (agente oxidante). Son reacciones oxido-reducción (Redox).
Elevadas temperaturas inactivaron a dichas enzimas, destruyéndolas. En cambio los inhibidores solamente suprimieron parcialmente la actividad en ellas.
La deshidrogenasa láctica para su identificación no...