Salsa de tomate

AISLAMIENTO, SEPARACIÓN Y PURIFICACÍON DE CAROTENOIDES CONTENIDOS EN LA SALSA DE TOMATE (Solanum lycopersicum), MEDIANTE CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA Y PREPARATIVA.





UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA FACULTAD DE QUIMICA FARMACÉUTICA MEDELLIN

CROMATOGRAFÍA La cromatografía (chromo = color y Graphie = escritura, escribir en colores) fue inventada en 1903 por el botánico ruso Mikhail tswett.Ismailov y Scraiber utilizaron láminas devidrio para colocar capas muy delgadas de alúmina y luego aplicaron extractos vegetales, dando así la primera forma de cromatografía de capa fina. EgonSthal (1956) dio el nombre de cromatografía de capa fina, estandarizo los procedimientos, equipos y adsorbentes dando un auge a esta técnica simple, económica y eficiente. (1) Terminología Fase Estacionaria(adsorbente) Es una de las dos fases que forman un sistema cromatográfico. Puede ser un sólido, un gel o un líquido. Si es un líquido, puede estar distribuido en un sólido, el cual puede o no contribuir al proceso de separación. El líquido puede también estar químicamente unido al sólido (fase ligada) o inmovilizado sobre él (fase inmovilizada). Los adsorbentes más utilizados son: • Silica gel ( seutiliza en el 80% de las separaciones)
•

Óxido de Aluminio o Alúmina ( ácida, neutra o básica)

• Tierra Silícea ó kieselguhr • Celulosa (Nativa o micro- cristalina) • Poliamidas. Estos sorbentes varían en el tamaño de la partícula, diámetro del poro homogeneidad y pureza. • Fase Móvil (eluente) Es el fluido (solvente o mezcla de solventes) que se filtra a través o a lo largo del lechoestacionario ( fase estacionaria), en una dirección definida. Puede ser líquido (Cromatografía liquida), un gas (Cromatografía de Gases) o un Fluido supercrítico). Cuando se utiliza un líquido como fase móvil mediante una serie eulotrópica se selecciona la mejor combinación de solventes miscibles para una buena separación cromatografía de una muestra en sus componentes.

Muestra. Mezcla consistente encierto número de componentes, cuya separación se pretende en el lecho cromatográfico al ser arrastrados o eluidos por la fase móvil. Componentes de la Muestra. Los constituyentes químicamente puros de la muestra pueden ser no retenidos por la fase estacionaria (es decir, no retardados), retenidos parcialmente (es decir a tiempos diferentes) o retenidos permanentemente. Clasificación de lacromatografía Clasificación de acuerdo a la forma del lecho cromatográfico • Cromatografía en columna • Cromatografía plana Clasificación de acuerdo al estado físico de la fase móvil • Cromatografía de Gases (GC) • Cromatografía Liquida (LC) • Cromatografía con fluido supercrítico (SFC) Clasificación de acuerdo al mecanismo de separación • Cromatografía de Adsorción • Cromatografía de Reparto •Cromatografía de Intercambio Iónico • Cromatografía de exclusión • Cromatografía de Afinidad Técnicas especiales • Cromatografía con Fase Invertida • Cromatografía con Fase Normal • Análisis Isocratico

• Elusión con Gradiente • Cromatografía Bidimensional Cromatografía en columna (CC) Es una técnica de separación en la que el lecho estacionario está contenido dentro de un tubo de vidrio vertical. Lamuestra es aplicada líquida o sólida (adsorbida por la fase estacionaria). Posteriormente se agrega el eluente por la parte superior del tubo cromatografico y se recogen volúmenes definidos por el analista de eluente luego de ser eluido por el tubo cromatográfico, separando una muestra en sus componentes. Cromatografía en Capa Fina (CCF) Es la técnica de separación en la que la fase estacionaria estásobre un plano formando una capa de partículas sólidas extendida sobre un soporte, tal como una placa de vidrio o aluminio (Thin Layer Chromatography. TLC), La muestra es aplicada en puntos o en banda, para posteriormente ser eluida dentro de un tanque cromatográfico. Si los componentes de la muestra (manchas) no son coloreados, se requiere de métodos que nos permitan visualizar los componentes...