Sensibilidad microbiana

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Sensibilidad Microbiana

* Macrodilución en Caldo
Fundamentos: consiste en exponer a las cepas a estudiar a diferentes concentraciones de antimicrobianos, en diluciones a la mitad y observar elcrecimiento de los microorganismos
para luego definir la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM).
* Materiales y método

En el método de macrodilución se emplea por cada combinación demicroorganismo con antimicrobiano, un juego de tubos.
Habitualmente se prepara el juego de tubos con 1ml de caldo MH suplementado con Ca++ y Mg++ estéril sin antimicrobiano.

Para un pequeño número depruebas se preparan diluciones al doble directamente en los tubos, del modo siguiente:

1) Se colocan 2 ml de solución de antibiótico en el primer tubo de la serie de diluciones.
En cada uno de lostubos restantes se añade 1 ml de caldo MH.
2) Con una pipeta estéril se transfiere 1 ml del primer tubo al segundo.
3) Después de mezclar el contenido del segundo tubo, se transfiere 1 ml conuna pipeta diferente (en esta transferencia y en todas las sucesivas) al tercer tubo.
4) El proceso continúa hasta el penúltimo tubo, al que se le quita 1 ml, que se descarta. El último tubo norecibe solución de antibiótico y sirve de control de crecimiento.

Las concentraciones finales de antibióticos en esta prueba son iguales a la mitad de la serie inicial de dilución, debido alagregado de una concentración igual de inóculo en el caldo.

Se prepara un inóculo bacteriano que contenga 105 a 106 UFC/ml ajustando la turbidez de un caldo de cultivo al estándar y diluyendo luego a1:200 en caldo. Añadir a cada tubo 1 ml del inóculo ajustado. Incubar los tubos a 35°C entre 16 y 20 horas.

* Método de disco difusión
Este es un método cualitativo, que se caracteriza por serfácilmente estandarizable y que está indicado para microorganismos no exigentes de crecimiento rápido.

Partiendo de una muestra clínica siempre se debe realizar un cultivo puro para poder comenzar...
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