Separacion cromatografica de colores sinteticos

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SEPARACION CROMATOGRAFICA DE COLORES SINTÉTICO
INTRODUCCION:
La cromatografía es una técnica de separación, identificación, determinación y purificación de mezclas, basados en la velocidad de desplazamiento de los componentes de dicha mezcla, esta velocidad se establece al pasar por una fase móvil (gaseosa o líquida) y una estacionaria (líquida o sólida) la cual se encuentra en un lechocromatográfico y por la que se hacen pasar los componentes de la mezcla.
Los principales fundamentos de esta técnica son:
a) Es muy improbable que 2 especies presenten cuantitativa y cualitativamente las mismas características físico-químicas, pero al ser estas muy pequeñas se aplica este método.
b) Algunas de las propiedades físico-químicas más importantes de los analitos son: solubilidad,adsorción (tendencia a ser retenidos en sólidos), volatilidad (tendencia a pasar al estado gaseoso), tamaño, etc.
c) Los componentes de los sistemas empleados deben estar en íntimo contacto entre sí, y el equilibrio establecido entre estos componentes debe ser lo más completo posible.
d) La base de separación en este método, será la diferencia de velocidad de migración de cada uno de loscompuestos de la mezcla
Existen 2 tipos de cromatografías y se clasifican dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria o móvil:
FASE MOVIL | LIQUIDO | L-L (por partición):*ambas fases son líquidas |
| | L-S:*la fase estacionaria es sólida |
| GAS | G-L *de participación |
| | G-S*de adsorción |
| FLUIDO SUPER CRITICO | Calentado a una temperatura superior a su temperaturacrítica y comprimida a una presión mayor a su punto crítico |
FASE ESTACIONARIA | SOLIDO | El sólido adsorbe al componente inicialmente estaba en fase móvil. |
| | *CAMBIO IÓNICO: el sólido es un cambiador de iones por fuerzas electrostáticas basada en la atracción entre iones del soluto y puntos cargados que existen en la fase estacionaria, grupos cargados positivamente en la fase estacionariaatraen aniones del soluto, puntos cargados negativamente que atraen cationes del soluto. |
| | EXCLUSION O GELES: el sólido=gel de polímeros no iónicos porosos retienen a las moléculas según su tamaño no es muy usada con los compuestos de alto peso molecular |
| | *AFINIDAD: el sólido se enlaza a un ligando (inhibidor enzimático o anticuerpo) |
| LIQUIDO | El líquido soporta a un sólidoinerte y se hace por partición |

EXISTEN 8 TIPOS DE TECNICAS PARA APLICACIÓN DE CORMATOGRAFIA:
1. EN CAPA FINA
2. EN PAPEL
3. EN COLUMNA
4. EN GASES
5. LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA O RENDIMIENTO
6. INTERCAMBIO IONICO
7. PERMEABILIDAD EN GEL
8. AFINIDAD

OBSERVACIONES
Acondicionamiento: al pasar el metanol reactivo por la columna de sílice física mente no seobserva ningún cambio solo que este se humedece, pero a nivel molecular las moléculas de la columna se solvatan convenientemente para solo adhieren los componentes no polares.

Aplicación de muestra: al adicionar el mililitro de colorante se ve como se absorbe este por el sílice y se hacen como unas capas en el sílice.

Lavado: esta se hace para eliminar impurezas.

Elución: Se pasametanol/agua por la columna para eliminar la interacción analito-solvente y eluir los compuestos de interés. Esto a diferentes porcentajes lo que provocaba varios colores El solvente adecuado ha de tener la máxima interacción con el analito y una interacción mínima con las demás impurezas, dejándolas en el lecho de adsorbente. El volumen de elución ha de ser el menor posible para mantener alto elfactor de concentración.
(Los adsorbentes con partículas pequeñas de 30 a 50mm requieren un menor volumen de elución que los adsorbentes con partículas mayores entre 90 y 140mm).
Cromatografía en capa fina (TLC): En nuestra placa de silica se colocaron las gotas de los eluyentes de interés según su color, que se obtuvieron dependiendo de la concentración del metanol ( figura2.1). Al...
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