Taller – tecnologia del adn recombinante

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TALLER – TECNOLOGIA DEL ADN RECOMBINANTE

1. Una muestra de ADN fue sometida a diferentes reacciones (mostradas abajo), cada una con DNApolimerasa, los dNTPs (mostrados abajo) y los ddNTPs(dideoxinucleotidos trifosfato) en relativas pequeñas cantidades.

Reacción 1: dATP, dTTP, dCTP, dGTP, ddTTP
Reacción 2: dATP, dTTP, dCTP, dGTP, ddGTP
Reacción 3: dATP, dCTP, dGTP, ddTTP
Reacción 4:dATP, dTTP, dCTP, dGTP

El ADN resultante fue separado por electroforesis en gel de poliacrilamida y las bandas fluorescentes en el gel fueron localizadas. El patrón de bandas resultantes de la mezclade nucleótidos 1 es mostrado abajo. Asuma que todas las mezclas fueron corridas en el mismo gel, como seria el bandeo obtenido para las líneas faltantes (2, 3 y 4)?



2. Después de amplificar elgen X en dos líneas celulares diferentes y comparar los productos obtenidos mediante electroforesis se observaron dos bandas idénticas (Líneas negras) como se observa en la figura 1. Posteriormente,se aisló el mRNA maduro para este mismo gen en las mismas líneas celulares y se observó la electroforesis (Figura 2). Este fenómeno puede deberse a:
a. el gen X está apagado en la línea celular Ab. la electroforesis está dañada porque no corren hacia el mismo polo
c. corte y empalme alternativo
d. los mRNA tienen carga neta diferente
Explica tu respuesta.

Figura 1 Figura 2
DNAmRNA
– Línea celular A Línea celular B – Línea celular A Línea celular B








+ +

3. Un estudiante está corriendouna electroforesis con los productos de sus extracciones. En el primer carril (1) siembra un marcador de peso molecular con los siguientes tamaños: 1 kb, 4 kb, 10 kb, 20 kb. En el segundo carril (2)siembra dos plásmidos circulares de 4 kb y 15 kb respectivamente. En el tercer carril (3) siembra el plásmido de 4 kb superenrollado. En el cuarto carril (4) siembra un DNA lineal de 15 kb.
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