Tarea de laboratorio

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Practica No 1

Citología hemática

Objetivo: Reconocer la estructura y la función de las células de la sangre.

Introducción:

La citología es una rama de la ciencia que se encarga del estudio de las células, tanto estructuralmente como funcionalmente.
La citología hemática, como su nombre lo dice, se enfoca a las células de la sangre. Esta se divide en: formula roja, formula blanca. Laformula roja abarca lo que es el conteo de los glóbulos rojos, así como también la cuantificación de hemoglobina y el hematocrito. La formula blanca abarca lo que es el conteo de glóbulos blancos y el conteo diferencial de estos.

Formula roja:

Conteo de glóbulos rojos:

Después de hacer la toma de muestra del paciente y ponerla en un tubo con EDTA se comienza con el procedimiento parahacer el conteo de glóbulos rojos.

Material:
* Pipeta Thomas para glóbulos rojos
* Cámara de Neubaver con cubre hematimetro
* Boquillas y mangueras especiales para la pipeta Thomas
* Gasas
* Microscopio
* Liquido de Hayem

Procedimiento:

1. Llenar la pipeta Thomas de sangre hasta la marca 0.5 con ayuda de la manguera y la boquilla
2. Limpiar la parte externa dela pipeta con la gasa
3. Completar con liquido de Hayem hasta la marca 101
4. Agitar durante 3 minutos para mezclar perfectamente
5. colocar el cubre hematímetro sobre la cámara.
6. desechar las primeras 2-3 gotas de la pipeta y llenar la cámara por uno de los bordes del cubre hematímetro.
7. se deja que el líquidos penetre lentamente entre la cuadrícula y el cubre hematímetrohasta que la plataforma de recuento este completamente cubierto.
8. dejar reposar de 3.5 minutos sobre la platina del microscopio.
9. con objetivo de 40x se cuentan los eritrocitos contenidos en 80 cuadros pequeños; uno central y cuatro de los extremos.

Cálculos:

Si se considera que el retículo central tiene 400 cuadritos se realizará el siguiente cálculo.

N x 200 x 10 x 400 = Nx 10,000
80
N= número de eritrocitos contados
200= factor de dilución
10= corrección x altura de la cámara

Valores de referencia:
Hombres 4.5 x 106 - 5.5 x 106 mm3
Mujeres 4.3 x 106 - 5.0 x 106 mm3

Resultados:

Determinación de hemoglobina

La hemoglobina es una proteína conjugada de color rojo integrantes de los eritrocitos entre un 31-34%.
Existen varios métodospara determinación como hematina ácida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; éste último es el de elección por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estándares de cianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotómetro de uso común y corriente.
La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactivo,con el ferrocianuro de potasio se oxidan el átomo de fierro de ferroso a férrico para producir metahemoglobina. El cianuro de potasio estabiliza la metahemoglobina pasando de cianometahemoglobina. La cloración producida es directamente proporcional a la concentración de hemoglobina presente.

Material:

* Pipetas de 1ml
* Pipetas Shali
* Cubetas para espectrofotómetro
* Liquidode Drabkin:
* Solución estándar de cianometahemoglobina.
* Espectrofotómetro

Procedimiento:

1. Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Drabkin
2. Llenar en sangre hasta la marca de la pipeta de Sahli
3. Mezclar la sangre con el disolvente
4. Dejar Reposar 10 min. Para la formación de cianometahemoglobina
5. Leer a 540 nanómetros en el espectrofotómetrocontra un blanco de reactivo.

Valores de referencia:
Mujeres: 12 -14 gr/dl
Mujeres embarazadas: 11-14 gr/dl
Hombres: 13-19gr/dl
Recién nacidos: 13.19gr/dl

Resultados:

Hematocrito

Es sencillo y exacto y es importante para determinar los índices eritrocitarios.
El hematocrito mide el porcentaje del volumen de sangre total pero ocupado solamente por los eritrocitos

Material:...
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