Tincion de gram

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UNIVERSIDAD RAFAEL LANDÍVAR
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
MEDICINA
LABORATORIO MICROBIOLOGIA MÉDICA

PRÁCTICA No. 1
TINICIONES SIMPLES Y TINICION DE GRAM

FUNDAMENTO TEÓRICO:

Lastinciones son procedimientos de gran importancia para la observación adecuada de microorganismos utilizando el microscopio. Se basan en la afinidad que tienen los componentes celulares para retener ciertoscompuestos químicos coloreados.
Existen múltiples tinciones, cada uno con un objetivo específico y un procedimiento distinto que permite dar el contraste necesario a las estructuras que se quieranobservar.
Durante esta práctica, se realizarán algunas tinciones simples y se distinguirán las propiedades de las bacterias frente a la coloración Gram.

MATERIALES Y EQUIPO

Cajas con crecimientobacteriano | Azul de metileno |
Colorantes Gram | Portaobjetos |
Tinta Parker negra o azul | Suspensión de levadura activada |
Gotero con agua | Microscopio |
Aceite de inmersión | Asa denicromo en argolla |
Guantes descartables | Mechero |
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A. TINCIONES SIMPLES

* Encender el mechero y colocar los materiales (portaobjetos con una gota de agua, medio de cultivo) dentrode una cuarta de diámetro alrededor del mismo, esto le garantiza la esterilidad de la muestra que se está procesando y protección personal.
* Con el asa de nicromo, tomar una colonia de bacteriasy frotarla en la gota de agua del portaobjetos.
* Flamear la lámina constantemente hasta que el agua se seque. Cuando el agua haya secado, coloque la lámina a la llama por aproximadamente 5segundos para fijar el frotis.
* Lleve la lámina al lugar de tinción y cúbrala con azul de metileno por 10 minutos.
* Elimine el exceso de colorante y enjuague con agua la lámina.
* Deje secaral aire y observe al microscopio en objetivo 100x.
* Anote las observaciones en la hoja de reporte.

B. TINCION DE GRAM

* Encender el mechero y colocar los materiales (portaobjetos...
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