Tincion De Gram

TINCIÓN DE GRAM

OBJETIVO:
Practicar la técnica de coloración de Gram y observar las principales formas y tipos de agrupamiento que presentan las bacterias.

FUNDAMENTO:
Uno de los métodos detinción más útil en bacterilogía es la coloración o tinción de Gram, la cual divide a las bacterias en dos grandes grupos: Bacterias Gram positivas
Y Bacterias Gram negativas, lo que ayudagrandemente en la identificación de las bacterias y en la selección del antibiótico adecuado para el tratamiento de la infección. De a cuerdo a su forma las bacterias se pueden dividir en tres grupos: cocos,bacilos y espirilos. Los cocos son de forma esférica que al agruparse en pares se les llama diplococos, en cadenas estreptococos o en racimos estafilococos. Los bacilos presentan una forma cilíndrica ypueden formar cadenas o agruparse en empalizadas o letras chinas como sucede con el bacilo diférico (Corynebacterium diphtheriae) sin embargo la mayoría de los bacilos no presenta ningún agrupamientoparticular. Los espirilos tienen una forma de espiral y no presentan ningún agrupamiento en especial.

MATERIAL Y EQUIPO:
Portaobjetos, Asa de Kohl bacteriológica, Cultivos de bacterias Grampositivos o Cultivo de bacterias Gram negativos, Equipo para Tinción de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y safranina), Mechero Bunsen, Contenedor de RPBI, bata, guates, cubre boca, material delimpieza, gradilla.

PROCEDIMIENTO:
1. Agregar media gota de agua en el centro del portaobjetos.
2. Esterilizar el asa de Kohl con la llama del mechero, enfriar y tomar una pequeña cantidadde la colonia crecida sobre el medio de cultivo, mezclar con la gota de agua, extenderla con el asa. Esterilizar el asa con la flama y dejarla en la gradilla.
3. Fijar la preparación al calor dela siguiente manera: tomar la preparación por uno de sus extremos con pinzas y calentar suavemente con la flama del mechero la cara inversa donde se depositaron las bacterias (evitar la calcinación...