Tincion gram

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Universidad Autónoma de Baja California
Instituto de Investigación en Ciencias Veterinarias






Métodos y Técnicas de Investigación Documental





“Tinción Gram”





Presentado por:
Acuña Benítez Gabriela
Berger Ochoa Jenniffer
López Belmontes Daniel
Montaño Herrera Alejandro





Profesora:
AlejandraLópez Soto
Mexicali, Baja California ., a 25 Mayo del 2012



Historia y Antecedentes
Técnica de tinción más importante y utilizada en el mundo, ya que diferencia a las bacterias en dos categorías.
Colorante gran creado por Hans Christian Gram en 1884, dividió las bacterias en dos categorías fundamentalmente diferentes, gran positivas y gram negativas.

Mientras examinabatejido pulmonar de un paciente que había muerto por neumonía Gram, descubrió que ciertos tintes eran retenidos preferentemente por ciertas células bacterianas, su primer paso fue colocar una superficie de vidrio y adherirlas a él fijándolas con fuego, colocó cristal violeta sobre ellas, después de lavar con agua agrego lugol (potassium triiodide solution), el cual descubrió que era un buen fijadordel tinte, colocó etanol sobre la muestra para lavar el tinte, se dio cuenta de que algunas bacterias retenían el color mientras otras se decoloraban por el alcohol.
Gram nunca utilizó el paso ya conocido por nosotros que es añadir safranina, pero pocos años después el patólogo alemán Carl Weigert, de Frankfurt adicionó la safranina al método de Gram complementándolo.


Dr. HansChristian Gram (1853-1938)
En 1923 después de la época dorada de Gram, comienzan las modificaciones a la versión original, llamándose esta, modificación Hucker; donde el cristal violeta se disuelve con alcohol etanol y se prepara con una solución oxalato de amonio.
Esta solución no puede durar más de 30 segundos sobre el frotis, después se aplica una solución yódica de gram, cambiando el alcoholetanos por alcohol cetona, para la decoloración de las bacterias, el cual no se dejará más de 5 segundos, colocando por último la safranina que es el contra tinte, para finalizar la tinción. Después de esta modificación el científico Kopeloff le hiso una modificación a la técnica de Hucker estas modificaciones ayudarían a que las bacterias que son fáciles de decolorar y que se tiñen ligeramentese tiñeran mejor y mejoraría su visión bajo el microscopio. Esto seria capas al cambiar las concentraciones de los tintes y los tiempos que se aplicarán estos mismos.

Reactivos de la tinción gram:
Cristal violeta: tinte primario.
Iodo gram: mordante
Alcohol etílico: 95% decolorante
Safranina: contra tinte o tinte secundario

Procedimiento 
1. Prepare un “frotis” de labacteria, deje secar y flamee para fijar. 
2. Añada varias gotas de cristal violeta a la laminilla y deje por 1 minuto. 
3. Lave con agua para remover el exceso de tinte. No lo seque. 
4. Añada iodo de Gram y deje por 1 minuto. 
5. Lave con agua para remover el exceso de iodo. No lo seque. 
6. Enjuague con alcohol al 95% hasta que se desaparezca el color violeta. 
Dejar mucho tiempo el alcoholpuede resultar en un falso Gram negativo. 
Dejar poco tiempo el alcohol puede resultar en un falso Gram positivo. 
7. Lave con agua para remover el exceso de alcohol. No lo seque. 
8. Añada varias gotas de safranina y deje por unos 45 segundos. 
9. Lave con agua para remover el exceso de tinte. 
10. Seque con bibulous paper y observe al microscopio. 





Gaby esta me gustopara ti







Bacterias gram positivas
Su nombre dado debido a su estructura de la envoltura celular , se puede llamar que es un tipo de organización celular , ya que gram positivas son uno de los principales grupos de bacterias existentes.
En su envoltura celular de las bacterias gram-positivas, comprende su membrana citoplasmática y una pared celular compuesta...
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