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PRACTICA Nro. 7
PRUEBAS PANTALLAS:

Las pruebas pantallas metabólicas son de grandisima utilidad, ya que con las mismas podemos detectar una gran cantidad de desordenes metabólicos, los cuales causan en el recién nacido en la mayoría de los casos retardo mental, el cual podría ser prevenido si se toman las medidas a tiempo, y si se diagnostican a tiempo. Siendo éste el principal motivo de estapractica.

TAMIZAJE METABOLICO

Se realizarán 5 pruebas pantallas:

TEST DE CLORURO FERRICO (METODO DE PERRY)
Procedimiento:
1.- Adicionar 1 ml del Reactivo Cloruro Férrico en un tubo.
2.- adicionar 10 gotas (0,5 cc) de orina centrifugada y mezclar bien.
3.- Observar el color.
Interpretación:
Compuesto: Color Resultante:
Acido Homogentisico No cambia
Acidop-hidroxifenilacético No cambia
Acido p-hidroxifenilpirúvico. No cambia
Acido imidazol pirúvico Azul
Acido 2-Cetoisocaproico Púrpura
Acido 2-Cetoisovalérico No cambia
Acido fenilpirúvico Verde oscuro.
Cualitativo para: Fenilcetonuria

TEST DE BENEDICT:
Procedimiento:
1.- Agregar 3 ml. De reactivo de Benedict.
2.- Agregar 6 gotas de Orina Centrifugada.
3.- Mezclar bien.
4.-Colocar en baño de agua hirviendo durante 3 minutos.
5.- observar el color inmediatamente.
Interpretación:
Color: Grado:
Azul o verde Neg.
Verde con precipitado amarillo +
Amarillo u oliva ++
Marrón +++
Naranja a rojo ++++
Cualitativa para: Azucares reductores.

TEST DE BROMURO DE CETILTRIMETILAMONIO (METODO DE RENUART)
Procedimiento:
1.- Agregar 5 ml. Deorina centrifugada.
2.- Adicionar 1 ml. De reactivo de Bromuro de Cetiltrimetilamonio.
3.- Mezclar bien.
4.- Observar la turbidez a los 30 minutos.
Interpretación:
Observación Interpretación
Formación de precipitado +
Cualitativa para: Mucopolisacaridos.




TEST DE DINITROFENILHIDRAZINA (METODO DE PENROSE Y QUASTEL)
Procedimiento:
1.- Agregar 1 ml. de orina centrifugada2.- Adicionar 1 ml. de reactivo de DNPH, mezclar bien.
3.- Observar a los 5 minutos.
Interpretacion:
Positivo: Formación de turbidez o de precipitado blanco – amarillo.
Negativo: Amarillo pálido o una solución clara.
Cualitativo para: Cetoaciduria.

TEST DE NITROSONAFTOL (METODO DE PERRY):
Procedimiento:
1.- Agregar 1 ml. de ácido nítrico (HNO3) 2,63N.
2.- Agregar 1 gota de nitritode sodio.
3.- Agregar 0,1 ml de reactivo de nitrosonaftol.
4.- Mezclar y adicionar 0,15 ml. de orina centrifugada.
5.- Mezclar bien.
6.- Observar la coloración a los 5 minutos.
Interpretación:
Positivo: Formación de un color rojo-naranja dentro del lapso de 5 minutos (2-5 minutos)
Negativo: Persistencia de color amarillo dentro del lapso de 5 minutos.
Cualitativa para: TirosinosisTEST DE NITROPRUSIATO-CIANURO (SPOT TEST) (MODIFICADO DE KNOX)
Procedimiento:
1.- Agregar 1 ml. de orina centrifugada.
2.- Adicionar 0,5 ml. de cianuro de sodio 5%
3.- Mezclar bien y adicionar 0,05 ml. de hidróxido de amonio concentrado.
4.- Esperar 10 minutos.
5.- Agregar 0,05 ml. de nitroprusiato de sodio.
6.- Observar el color.
Interpretación:
Positivo: Color rojo cereza queaparece inmediatamente y permanece por unos minutos.
Especificidad: Positivo para algunos grupos sulfidrilos libres.
Cualitativa para: Cistinuria – homocistinuria.
PRACTICA Nro. 8.
PRUEBAS PANTALLAS METABOLICAS
CROMATOGRAFIA DE AMINOACIDOS

La cromatografía de aminoácidos (a.a.) es una prueba cualitativa que se utiliza para separar e identificar los diferentes a.a. con respecto a su gradientede solubilidad. Pueden realizarse con muestras de orina o cualquier otro fluido corporal, a la vez que se pueden aplicar varias técnicas: cromatografía en columna, en papel, en capa fina, etc. La técnica que realizaremos consiste en una capa fina de celulosa colocada sobre un vidrio y un líquido que no es más que el solvente, dicho solvente representa la fase movil y el agua que se encuentra...