Western, northern, southern blot

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NOTHERN BLOT

El Northern Blot es una técnica de detección de moléculas de ácido ribonucleico (ARN) de una secuencia dada dentro de una mezcla compleja (por ejemplo, un ARN mensajero para unpéptido dado en una extracción de ARN total).Para ello, se toma la mezcla de ARN y se somete a una electroforesis en gel a fin de separar los fragmentos en base a su tamaño. Tras esto, se transfiere elcontenido del gel, ya resuelto, a una membrana cargada positivamente en la cual se efectúa la hibridación de una sonda molecular marcada radiactiva o químicamente.

El nombre de la técnica deriva de lapropia de la detección de ácido desoxirribonucleico (ADN), denominada Southern blot en honor a su descubridor; de este modo, al desarrollarse la técnica equivalente para ARN se empleo el punto cardinalopuesto («northern», septentrional en inglés, frente al meridional «southern»).

WESTERN BLOT

El Western blot, o inmunoblot, es una técnica analítica usada para detectar proteínas específicas enuna muestra determinada (una mezcla compleja de proteínas, como un extracto tisular). Mediante una electroforesis en gel se separan las proteínas atendiendo al criterio que se desee: peso molecular,estructura, hidrofobicidad... Hay casi tantas posibilidades como tipos de electroforesis existen. Luego son transferidas a una membrana adsorbente (típicamente de nitrocelulosa o de PVDF) para poderbuscar la proteína de interés con anticuerpos específicos contra ella. Finalmente, se detecta la unión antígeno-anticuerpo por actividad enzimática, fluorescencia... De esta forma se puede estudiar lapresencia de la proteína en el extracto y analizar su cantidad relativa respecto a otras proteínas.
Esta técnica es hoy en día imprescindible en varios campos de la biología, como la biologíamolecular, la bioquímica, la biotecnología o la inmunología.

SOUTHERN BLOT

Southern blot, hibridación Southern o, simplemente, Southern, es un método de biología molecular que permite detectar la...
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