Universidad Andrés Bello
Facultad de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Biología Molecular y Genética General
Profesores: Pablo Cisternas.
Raquel Ibáñez.




TRABAJO PRÁCTICO N°1

DNA Fingerprint

BIO041








Autores: Maureen Araya P.
Catalina ReyesC.
Victoria Rojas S.
Natalia Ventura Z.


-2015-

INTRODUCCION
La ciencia desde sus inicios hasta la actualidad ha tenido grandes avances y descubrimientos, los cuales hoy endía permiten introducirse en diferentes campos e ir ampliándolos constantemente. Un campo que se ha explorado e investigado cada vez más corresponde a la biología molecular y sus técnicas, las que tienen diversas aplicaciones destacándose el área de la salud, genética e investigación.
En el siguiente informe se daré a conocer y profundizar la técnica llamada FingerPrint o huella dactilar deDNA, la que comienza a aplicarse en el área forense en el año 1985 en manos de Alec J. Jeffreys, profesor de genética de la Universidad de Leicester, con el fin de encontrar secuencias en ciertas regiones de DNA que son los VNTRs, número de repeticiones en tándem de una secuencia central, utilizando para su análisis la técnica de RFLP (fragmentos de restricción de largo polimórfico), quecorresponden a los fragmentos generados por la digestión con enzimas de restricción. Algunas de sus aplicaciones son pruebas de paternidad, medicina forense, entre otros. (1)
En esta ocasión se presenta un caso de criminalística en el que se encuentra sangre de la que se extrae una muestra de DNA que se atribuye al asesino, para analizar dicha muestra se utilizan enzimas de restricción que son denominadastambién como las “tijeras moleculares”, que se encargan de digerir fragmentos de DNA, cortan en lugares específicos, los sitios de restricción, y finalmente se obtienen los RFLP. Los fragmentos obtenidos de la digestión son sometidos a análisis a través de un DNA FingerPrint con electroforesis en geles de agarosa, donde en los resultados se observarán patrones de bandeo de los 5 sospechosos queserán comparados con la muestra hallada en la escena del crimen, esto permite establecer diferencias y semejanzas entre los individuos y aquí acusará quién de los sospechosos es el que estuvo presente en la escena del crimen.

OBJETIVOS

Conocer los fundamentos del DNA Fingerprint y realizar dicha técnica de la Biología molecular.
Aprender a preparar el del de agarosa para la electroforesis.
Llevar acabo los procedimientos de la electroforesis en gel de agarosa y demostrar los principios.
Interpretar los resultados del experimento, a través de la comparación entre diversos patrones de bandeo y así establecer diferencias y semejanzas entre ellos.
Dilucidar por medio de la técnica de DNA Fingerprint, cuál de los cinco sospechosos es el que estuvo presente en la escena del crimen.


MATERIALESY METODOS
En primer lugar se preparara la muestra de DNA, para esto se disponen de 6 tubos de colores donde serán puestas las muestras recolectadas de la escena del crimen y de los 5 posibles sospechosos. Luego identificar en el recipiente de hielo la enzima marcada ENZ, utilizar una micropipeta de 20 µl para poner 10 µl de esta enzima en los tubos, ocupando la misma punta de la pipeta para todoslos tubos. Se identifica dónde están las muestras de DNA para sacar 10 microlitros de cada una, las cuales corresponderán a EC (Escena del crimen) y S1 a S5 (escena del crimen) para este proceso se debe cambiar la punta de la micropipeta para cada muestra en el tubo correspondiente, luego tapar.
Llevar a centrifuga por 10 s. a velocidad máxima para asegurarnos que el DNA y la enzima de cada...