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Páginas: 13 (3149 palabras)
Publicado: 28 de septiembre de 2015
Práctica 1. TÉCNICA HISTOLÓGICA
OBJETIVO
El alumno conocerá la importancia de la preservación de los tejidos para su estudio histológico.
INTRODUCCIÓN
Las células cuando son extraídas de los organismos mueren por falta de nutrientes y de factores de su micro-ambiente y sufren procesos de descomposición debido a la acción de enzimas como proteasas, lipasas, DNAasas, RNAasas que comienzan adestruir el tejido. Los tejidos deben ser tratados para su preservación, por lo que se utilizan diversas técnicas de preservación para mantener las estructuras conservadas de la célula. La técnica a utilizar depende del tipo de estudio y del tipo de tejido a utilizar. Si desean realizar un estudio rápido del tejido se utiliza la técnica por congelación la cual permite detener la actividad de lasenzimas. Si desea realizar un estudio más completo de la estructura celular y requiere mayor tiempo de realización se puede utilizar la preservación por fijación del tejido. Los estudios más finos de la célula como la observación de su ultra estructura el tejido pasa por fijación más rigurosa para poder obsérvalo por microscopio electrónico.
Métodos histológicos
La célula es la estructura básicavital del organismo y está compuesta principalmente de proteínas, hidratos de carbono, lípidos y sales inorgánicas, por lo que el objetivo principal de la fijación es la preservación de los componentes celulares para así evitar la autolisis y la proliferación que altera los componentes celulares, conservando la arquitectura y composición tisular lo más semejante a como se encuentra en elorganismo vivo, así como también el de seleccionar el agente fijador.
Fijación
Los tipos de fijación son variados y depende del tejido. Algunos funcionan deshidratando los tejidos como son los alcoholes (etanol, metanol), o combinados con ácidos (ácido acético, pícricos), ácidos crómicos. Otros fijadores polimerizan para formar un red entre la célula y de esa formar conservar la estructuracelular, tales como formaldehído, formol y paraformaldehído, glutaraldehído. Otros más son compuestos más fuertes como cacodilato o sales de osmio, platino y mercurio.
Las desventajas del uso de los fijadores es que son tóxicos para las células vivas de nuestro cuerpo, pueden ser irritantes, fijan las células y algunos son cancerígenos, por lo que se deben utilizar con las medidas adecuadas(guantes, gafas protectoras, mascarillas). El tiempo de fijación oscila entre 30 minutos a 12 horas dependiendo del grosor del tejido, las células libres requieren solo de 30 minutos, tejido delgado de 2 horas y más grueso hasta de 12 horas, entre más delgado sea el tejido mejor se fijará.
Una imagen igual ha de observarse en todos los tejidos idénticos obtenidos de diferentes individuos de una mismaespecie. Su reproducibilidad en todas las preparaciones histológicas obtenidas de los tejidos, independientemente del proceso de fijación. Principios generales de la fijación. No existe un método universal de fijación. No todos los fijadores conservan indefinidamente el tejido. Un defecto de fijación jamás puede ser corregido. Es imposible realizar un estudio histológico sobre un materialcon graves defectos de fijación.
Cantidad de fijador. Por lo menos de 10 a 15 volúmenes de fijador deben de ser utilizados por cada volumen de tejido. Penetración: ningún fijador penetrará más de 2 a 5 mm, en tejido dolido, y 0.5 cm en tejido poroso, en un periodo de 24 horas. Tiempo: la mayoría de los tejidos deben de permanecer en fijación por lo menos 12 horas. Temperatura: la mayoría de losfijadores se realizan a temperatura ambiente. Calor: el calor coagulará las proteínas, pero no se recomienda para la fijación.
Corte
Una vez fijado el tejido se procede a realizar cortes del tejido para su observación al microscopio. El grosor de las rebanas oscilan entre 300 micras a 100 Armstrong. Para cortar el tejido se utilizan micrótomos, existen diferentes tipos: tenemos el criostato...
Práctica 1. TÉCNICA HISTOLÓGICA
OBJETIVO
El alumno conocerá la importancia de la preservación de los tejidos para su estudio histológico.
INTRODUCCIÓN
Las células cuando son extraídas de los organismos mueren por falta de nutrientes y de factores de su micro-ambiente y sufren procesos de descomposición debido a la acción de enzimas como proteasas, lipasas, DNAasas, RNAasas que comienzan adestruir el tejido. Los tejidos deben ser tratados para su preservación, por lo que se utilizan diversas técnicas de preservación para mantener las estructuras conservadas de la célula. La técnica a utilizar depende del tipo de estudio y del tipo de tejido a utilizar. Si desean realizar un estudio rápido del tejido se utiliza la técnica por congelación la cual permite detener la actividad de lasenzimas. Si desea realizar un estudio más completo de la estructura celular y requiere mayor tiempo de realización se puede utilizar la preservación por fijación del tejido. Los estudios más finos de la célula como la observación de su ultra estructura el tejido pasa por fijación más rigurosa para poder obsérvalo por microscopio electrónico.
Métodos histológicos
La célula es la estructura básicavital del organismo y está compuesta principalmente de proteínas, hidratos de carbono, lípidos y sales inorgánicas, por lo que el objetivo principal de la fijación es la preservación de los componentes celulares para así evitar la autolisis y la proliferación que altera los componentes celulares, conservando la arquitectura y composición tisular lo más semejante a como se encuentra en elorganismo vivo, así como también el de seleccionar el agente fijador.
Fijación
Los tipos de fijación son variados y depende del tejido. Algunos funcionan deshidratando los tejidos como son los alcoholes (etanol, metanol), o combinados con ácidos (ácido acético, pícricos), ácidos crómicos. Otros fijadores polimerizan para formar un red entre la célula y de esa formar conservar la estructuracelular, tales como formaldehído, formol y paraformaldehído, glutaraldehído. Otros más son compuestos más fuertes como cacodilato o sales de osmio, platino y mercurio.
Las desventajas del uso de los fijadores es que son tóxicos para las células vivas de nuestro cuerpo, pueden ser irritantes, fijan las células y algunos son cancerígenos, por lo que se deben utilizar con las medidas adecuadas(guantes, gafas protectoras, mascarillas). El tiempo de fijación oscila entre 30 minutos a 12 horas dependiendo del grosor del tejido, las células libres requieren solo de 30 minutos, tejido delgado de 2 horas y más grueso hasta de 12 horas, entre más delgado sea el tejido mejor se fijará.
Una imagen igual ha de observarse en todos los tejidos idénticos obtenidos de diferentes individuos de una mismaespecie. Su reproducibilidad en todas las preparaciones histológicas obtenidas de los tejidos, independientemente del proceso de fijación. Principios generales de la fijación. No existe un método universal de fijación. No todos los fijadores conservan indefinidamente el tejido. Un defecto de fijación jamás puede ser corregido. Es imposible realizar un estudio histológico sobre un materialcon graves defectos de fijación.
Cantidad de fijador. Por lo menos de 10 a 15 volúmenes de fijador deben de ser utilizados por cada volumen de tejido. Penetración: ningún fijador penetrará más de 2 a 5 mm, en tejido dolido, y 0.5 cm en tejido poroso, en un periodo de 24 horas. Tiempo: la mayoría de los tejidos deben de permanecer en fijación por lo menos 12 horas. Temperatura: la mayoría de losfijadores se realizan a temperatura ambiente. Calor: el calor coagulará las proteínas, pero no se recomienda para la fijación.
Corte
Una vez fijado el tejido se procede a realizar cortes del tejido para su observación al microscopio. El grosor de las rebanas oscilan entre 300 micras a 100 Armstrong. Para cortar el tejido se utilizan micrótomos, existen diferentes tipos: tenemos el criostato...
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