03 Medios De Cultivos

Objetivos

Preparación de medios de
cultivo
Curso: “Métodos en fitopatología”

„ Conocer a que denominamos medio de

cultivo en el laboratorio de Fitopatología.
„ Reconocer la existencia de diferentes tipos
de medio.
„ Reconocer la utilidad de los diferentes
medios de cultivo en el trabajo con
patógenos de plantas.

Dr. Pedro Mondino
24 de abril de 2009

Objetivos
„ El alumno debe:

1) ser capazde elaborar medios de cultivo
con el fin de ser utilizados posteriormente
para el aislamiento de hongos, bacterias o
microorganismos epifíticos.
„ 2) Desenvolverse con soltura en la
utilización de protocolos.
„

Condiciones que debe reunir un Medio de
cultivo

Medios de cultivo
„ Los medios de cultivo de microorganismos

(hongos, bacterias, levaduras) son esenciales
en el Laboratorio deFitopatología por lo que
a diario se preparan y utilizan.
„ Los medios de cultivo son una mezcla de
nutrientes que, en concentraciones adecuadas
y en condiciones físicas óptimas, permiten el
crecimiento de los microorganismos.

Disponibilidad de nutrientes en los
Medios de cultivo.

„ Para

que los microorganismos crezcan
adecuadamente, un medio de cultivo artificial
debe reunir una serie de condiciones:
„contener los nutrientes y factores de crecimiento

necesarios
disponer de oxígeno
„ temperatura adecuada
„ humedad
„ pH.
„ exento de microorganismos contaminantes.
„

„ Un medio de cultivo para que permita el crecimiento

adecuado de microorganismos debe contener como
mínimo:
„ Carbono
„ Nitrógeno
„ Azufre
„ Fósforo
„ Sales inorgánicas que suplan iones (K, Mg, Fe,
Ca, etc.).

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Disponibilidad denutrientes en los Medios de
cultivo

Medios de cultivo según su composición
„ Medios Naturales. Consisten únicamente en un

„ Estos nutrientes generalmente se aportan con

Extracto de malta, Peptona, Papa, extracto de
levadura, etc.

Medios de cultivo según su composición
„ Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una

„
„
„
„
„
„
„
„

composición química definida cuali ycuantitativamente.
Generalmente se usan en trabajos de investigación.
Ej: Medio Czapek.
Nitrato de Sodio 2 g/l
Fosfato bipotásico 1 g/l
Cloruro de potasio 0,5 g/l
Sulfato de magnesio heptahidratado 0,5 g/l
Sulfato de hierro heptahidratado 0,01 g/l
Sacarosa 30 g/l
Agar-agar 15 g/l

Medios complejos
„ Agar Papa Dextrosa:
„ Medio para el cultivo y conteo de levaduras y
„
„
„
„

hongos en general.
Agar -15gDextrosa - 20g
Infusión papa - 4g
Agua destilada 1L

material vegetal. Ejemplos: un trozo de papa. Agar
jugo de manzana, Agar durazno, Agar y jugo de
vegetales.

Medios de cultivo según su composición
„ Medios complejos o de composición

indefinida: Son medios cuya composición no
se conoce con exactitud.
„ contienen nutrientes en abundancia pero sin
saber con exactitud la composición cualitativa
nicuantitativa de estos nutrientes.
„ Ej: Agar Papa; Agar Malta;

Medios de cultivo según su estado físico
„ Los medios de cultivo utilizados pueden ser de

diferentes tipos:
„ Medios sólidos.
„ Medio semisólidos.
„ Medios líquidos.

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Medios de cultivo

Medios sólidos de cultivo
„ Usualmente para preparar un medio sólido se parte

de un medio líquido al que se le añade un agente
solidificantecomo el agar
„ El agar es un polisacárido extraído de algas.
„ En los medios sólidos la proporción de Agar es
siempre por encima del 15%

Medios de cultivo
„ El agar es el elemento solidificante más

empleado en la preparación de medios de
cultivo.
„ Sus características principales son:

Medios semi-sólidos de cultivo
„ En los medios semi-sólidos la proporción de Agar es

de alrededor del 5%

„

Selicua completamente a temperaturas de 80 –100
ºC y se solidifica al enfriarse a 40 grados.
„ No afecta el crecimiento de hongos ni bacterias.
„ No es utilizado por los microorganismos que crecen
en él.

Medio Agar Agua

Medios de cultivo
„ En ocasiones se añaden al medio de cultivo sustancias

„ Se trata de un medio sin el agregado de nutriente

alguno.
„ Utilidad

indicadoras de actividades...