1 BIOCEL TECNICAS CEL

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE
HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE FARMACIA Y
BIOQUÍMICA

BIOLOGÍA CELULAR
MÉTODOS DE ESTUDIO EN
BIOLOGÍA CELULAR

Métodos de estudio de la célula
•

La Biología celular en su desarrollo ha
incorporado muchos instrumentos a
través del tiempo:

 El microscopio óptico, microscopio
electrónico de transmisión, debarrido,
microscopio
de
fluorescencia.
La
fotografía electrónica.
 Los instrumentos de disección simples
hasta el micrótomo.
 Los instrumentos para detectar ondas
sonoras, transformados en la ecografía.
 El
análisis
de
sustancias
por
cromatografía, la electroforesis, etc.

Métodos de estudio en Biología
celular
En el siglo XX, el desarrollo de nueva
tecnología: microscopios electrónicos detransmisión y los de barrido, ultramicrótomos,
nuevas técnicas de fijación y tinción, el uso de
resinas
termoendurecibles,
el
marcaje
isotópico, la autorradiografía, marcaron un
salto cualitativo en el desarrollo de la
histología y la citología.
La influencia de la bioquímica, la genética y la
fisiología también dieron su aporte en el
mismo sentido.

Métodos de estudio de la célula
1. Estudiomorfológico de la célula:







Necesidad de microscopio: óptico y electrónico.
Extensión ó Fijación-Inclusión-Corte.
Adherir (frotis).
Tinción.
Montaje.
Observación.



Difracción de rayos X.

2. El estudio fisicoquímico de la célula:




Fraccionamiento celular, ultracentrifugación.
Cromatografía, electroforesis.
Métodos citoquímicos.

Evolución del microscopio
S. XVII

S. XIX

- XX

-

XVIIIMicroscopio óptico compuesto

Instrumento que con técnicas permite la visualización de la estructura
celular.
Los actuales, son capaces de aumentar los objetos hasta unas mil veces.
La mayoría de las células presentan entre 1 y 100 μm (micrones) de
diámetro, pudiendo ser observadas en el microscopio óptico, así como algunos
organelos celulares (núcleo, cloroplastos, mitocondrias, etc). Sinembargo, el
microscopio óptico no es lo suficientemente poderoso para observar pequeños

Microscopio electrónico

Microscopia electrónica

Espermatozoides bovinos.(MEB). Fuente: Dr.
G.Crudelli, Fac. Veterinarias, UNNE.

Bacterias creciendo sobre un estoma  4000X (MET).

Ventajas de los microscopios ópticos y
electrónicos
Los biólogos usan ambos microscopios
para investigar la estructura y lasactividades de los
organismos vivos. Los dos tipos tienen fortalezas y debilidades debido a que son usados para
propósitos diferentes.

Microscopios ópticos
 El
material
puede
ser
preparado fácilmente para
la examinación.
 Se
puede
examinar
el
material vivo sin necesidad
de estar muerto.
 Se
puede
observar
movimiento si el material
examinado está vivo.
 Se pueden ver los colores.
 El campo devisión es
relativamente grande (2 mm).
 La
resolución
es
relativamente
pobre
(resolución:
0,25
mm;

Microscopios electrónico
 Preparación compleja del
material para la examinación
(incluye
muchos
procedimientos).
 El material vivo no puede
sobrevivir al interior.
 Sin movimiento porque el
material está muerto siempre,
solo se puede deducir.
 Sólo
imágenes
monocromáticas.
 El campo de visión esmuy
reducido (100 mm).
 La resolución es muy buena
(resolución:
0,25
nm;

Microscopios

Visión al microscopio óptico y al
electrónico

Microscopía de
fluorescencia

Células epiteliales , triple coloración: núcleo (azul), microtúbulos (verdes), actina
(rojo). 200X (izq.) y 1000X  (der.).

Métodos de estudio en Biología
celular
•Cultivos celulares: Líneas primarias, secundarias
y establecidas(células HeLa y L).

Técnica de preparación de
muestras
Para observar células
vivas, se utilizar colorantes
que no sean nocivos para las
mismas como el rojo neutro
o el azul de metileno.
Se
usan
diversas
técnicas como la fijación,
inclusión, tinción y corte.
Esto cuando la observación
se hace en un microscopio
óptico.

 Es más frecuente realizar los
análisis con células muertas que
conservan...