11 de septiembre

TEMA 6: TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
1. Introducción
2. Clasificación de los métodos cromatográficos
3. Consideraciones generales sobre la cromatografía de elución
4. Análisis químico con métodos cromatográficos
5. Cromatografía de gases
6. Cromatografía de líquidos

1. INTRODUCCIÓN
La mayoría de los métodos de análisis son en los casos más favorables selectivos,
pero no específicos. Porello, cuando se trata de muestras complejas la separación del
analito de de las posibles interferencias es una etapa esencial. Aún mejor sería la
posibilidad de determinar varios analitos después de una separación previa.
Uno de los mejores métodos para conseguir esa separación, y posiblemente, el más
utilizado es la cromatografía. Este conjunto de técnicas permite la separación de
componentesestrechamente relacionados en mezclas complejas. La cromatografía en
sus orígenes era exclusivamente una técnica de separación que se transformó en
técnica de análisis cuando se acopló con un dispositivo para monitorizar las especies
químicas que se iban separando. Así, la cromatografía se ha convertido en un método
analítico de primer orden para separar, identificar y cuantificar loscompuestos
presentes en muestras líquidas o gaseosas (para muestras sólidas se requiere una
etapa de disolución o extracción).
En cromatografía, los solutos se separan en base a la distinta velocidad de
desplazamiento cuando son arrastrados por una fase móvil a través de un lecho
cromatográfico que contiene a una fase estacionaria (sólida o liquída).
La muestra se disuelve en la fase movil y se hacepasar a través de la fase
estacionaria (inmiscible con la móvil) que se mantiene fija en una columna o sobre una
superficie plana. Las dos fases se eligen de tal modo que los componentes de la
muestra se distribuyen de modo distinto entre las dos fases. Aquellos que son
fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de
fase móvil, mientras que los que seretiene débilmente avanzan con más rapidez.

2. CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS
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Las

técnicas

cromatográficas

pueden

clasificarse

según

diferentes

criterios:

atendiendo al modo como las fases se ponen en contacto y atendiendo a fundamento
del proceso de separación. En este último caso en definitiva se trata de la naturaleza
de las fases y del tipo deinteracciones que tienen lugar entre lso solutos y las fases
utilizadas.
Clasificación atendiendo al fundamento de la separación (naturaleza de las fases
y tipo de interacciones):

A. CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS (fase móvil líquida)
Fase estacionaria sólida: se trata de sólidos finamente divididos (con gran superficie
específica)
- Cromatografía de adsorción: la fase estacionaria sólida retienea los solutos por un
doble efecto de adsroción física y química. Las interacciones implicadas son del tipo
de furezas de van der Waals.
- Cromatografía de cambio iónico: el sólido retiene a los solutos gracias a
atracciones electrostáticas. La fase estacionaria sólida lleva en la superficie cargas
electrostáticas fijas, que retienen contraiones móviles que pueden intercambiarse por
iones dela fase móvil.
- Cromatografía de exclusión: la fase estacionaria es un material poroso, que retiene
a las moléculas en función de su tamaño. en ocasiones se denomina también
cromatografía de filtración sobre geles o de permeabilidad en geles (GPC).

Fase estacionaria líquida:
- Cromatografía de reparto: la fase estacionaria es un líquidos inmovilizados sobre
un material inerte sólido quesólo actúa de soporte.
- Cromatografía de afinidad o de fases enlazadas: la fase estacionaria es
generalmente un polímero de tipo líquido inmovilizado sobre un sólido inerte por
enlaces covalentes.
En ambos casos la separación se debe a equilibrios de distribución de los solutos
entre las fases móvil y estacionaria controlados por la diferente solubilidad de los
mismos en las distintas...