2-Aliloxifenol, Actividades Biologicas Y Aplicaciones

Actividades Biológicas y Aplicaciones

Grupo de bacterias:  Gram +


Filamentosas: crecimiento en red (micelio)
Hongos Dominio Bacteria:
carencia de núcleo, mitocondrias y cloroplastos



Formadoras esporas Hábitat: tierra (descomponen la Mat. Org.)





Ambiente marino: gran diversidad de antinomycetes marinos (no explotados para
obtener nuevos metabolitos 2°)
Formanfilamentos ramificados
Alto contenido CG en su DNA Diversos subgrupos Oxígeno

Generan micelio o no

Sundarbans, Bahía de Bengala (India)
Por qué?
* Fuente de bacterias marinas activas
* De muestras de sedimentos se aislaron numerosos Actinomycetes (mayoría pertenecía al género Streptomyces)
¿Por qué son importantes?
Sudarbans: Es el mayor bosque de Manglares que se encuentran en lasmareas.

Muchas producen antibióticos


Metabolitos Secundarios

Micelio

Permanece intacto Diferenciado: vegetativo y aéreo (+ abuntante)



Cadenas largas de esporas (1/2 sólido, líquido no) F de C: gran variedad de compuestos Olor tierra (metabolitos que genera)







pH alcalinos y neutros
Requieren poca H20 Aerobios estrictos





Suspensión del sueloSiembra ½ enriquecimiento

Incuba 25°C

Colonias Aspecto típico

*K2HPO4 (0.5 g/l) *Caseína (3 g/l) *Peptona (1 g/l) *Almidón (10 g/l) *Extracto de levadura (1 g/l) y de malta (10 g/l) *Agar (15 g/l) *H2O destilada y de mar (500 ml) *pH: 7,5

-Cerosas, polvorosas -De color variable (blanco a negras) -Micelio aéreo no planas

Cepa MS 1/7
Aislo (Cromatografía en columna)

Comp. Activo(C20H2802) prop. Antimicrobianas

Otras fracciones eluidas mostraron actividad AM

Objetivo: Caracterizar alguna de

estas fracciones.



Gram + Forma esporas Produce micelio: -vegetativo -aéreo blanco





No requieren NaCl. Son halotolerantes, debido a su hábitat entermareal




Forma sustrato micelio ramificado (color gris a verde oliva) Reverso colonia : marrónMorfología de las cadenas: Examen Oro-Paladio
cubrió





Especímenes deshidratadas: Crecer Agar ISP2

Peptona (5 g/l) Extracto de Levadura (3 g/l) Glucosa (5 g/l)

Oro-Paladio

Microscopio Barrido electrónico

Hifas aéreas llevan cadenas de esporas con arreglo rectus flexibilis

Fuente de carbono: Creció: No creció: Glucosa


Xilosa Manitol Fructuosa

Arabinosa Sacarosa InositolRamnosa

Género Streptomyces



Ácidos grasos celulares extraídos: típicos del género Streptomyces



Especie: Estudio del rDNA 16S

1° 500 pb mostraron una mayor similitud con especies del género Streptomyces: S. puniceus

S. floridae S. californicus



Pigmentos melanoides: No se observaron (1/2 peptona-Fe y tyr) No es posible identificar a la cepa con una especie dentro delgénero Streptomyces

Nueva especie

Suspensión Bacterias
*Semejante al agua de mar *pH 7,2: favorable para su crecimiento
Evapora + fácil Acetato de butilo

inocularon ½ Marina Difco modificado

Extracción 1-butanol Fase acuosa Fase orgánica
-Concentra a sequedad -Disuelve: Metanol -Almacena 0-4°C

Recuperación más eficiente

Separación: Cromatografía en columna
faseestacionario: gel de sílice fase móvil: CHCl3/éter de petróleo

2-aliloxifenol



Pureza: Metodologías CG y HPLC

Cromatograma se ve un pico

Producto puro Caracterización Aceite de color marrón oscuro con aroma a humo -Densidad: 1,1g/ml -Punto de ebullición(destilación): 247.0°C -Ligeramente soluble en H20


Estructura *IR: -OH, C=C y aromáticos *RMN 1H: CH2-O, aromáticas, CH y CH2 olefínico,-OH (intercambiable, en DMSO se ve señal pero en D2O no) *RMN 13C: confirma la presencia de dos CH2 *Masas: indica fórmula molecular


Fórmula molecular: C9H10O2 Estructura molecular:

2-aliloxifenol



CIM: Método de dilución en Agar
solidificar (conc. cte)

Antimicrobiano se le agrega al agar

Inocula

Incuba
Infusión de Carne 30% Almidón 0.15% Peptona de Caseína 1.75%...