2
PRÁCTICAS DE
LABORATORIO
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
GENÉTICA MOLECULAR
FICHA TECNICA
PRÁCTICA DE LABORATORIO
GENÉTICA MOLECULAR
Fecha:
Nombre del catedrático:
EDUARDO GUZMÁN OLEA
Nombre de la práctica:
EXTRACCIÓN DE ADN PLASMÍDICO Y ELECTROFORESIS
Clave:
Número de práctica:
2y3
Duración en horas:
03
Justificación:
La purificación de ADN plasmídico y su caracterizaciónmediante
electroforesis en gel de agarosa, proporcionará a los alumnos
herramientas que incrementarán su competitividad como
ingenieros biotecnólogos.
Objetivos/Resultados de
- Que el alumno comprenda los requerimientos y procedimientos
aprendizaje:
necesarios para la purificación de ADN plasmídico en
investigación, así como su caracterización y análisis mediante
electroforesis.
Laboratorio donde sedesarrolla la práctica: Laboratorio 03 de biotecnología.
Actividades a desarrollar:
1. Identificar los elementos y soluciones requeridos para la purificación de ácidos
nucleícos.
2. Obtener el ADN plasmídico purificado.
3. Determinar la concentración del ADN plasmídico purificado.
4. Caracterizar el plásmido obtenido mediante electroforesis.
Evidencia a generar en el desarrollo de la práctica:
-Reportes por equipo de trabajo.
- Materiales y soluciones requeridas.
- ADN plasmídico purificado y caracterizado.
COMPETENCIAS
HABILIDADES
Utilizar técnicas de análisis para determinar
las características de los productos
biotecnológicos mediante parámetros físicos,
químicos.
Realizar el informe de los resultados de los
análisis que permitan caracterizar el producto
con base a sus propiedadesfísicas, químicas y
biológicas.
Al finalizar la práctica, el alumno debe ser
capaz de:
- Preparar los materiales y soluciones
utilizadas en biología molecular.
Comprender el procedimiento,
preparación previa de materiales y
soluciones y análisis electroforético
del ADN plasmídico purificado.
Elaboró: Eduardo Guzmán Olea
Revisó:
INTRODUCCIÓN
.
OBJETIVOS
1.- Aislar y purificar ADN plasmídico.
2.-Caracterización del gen y su visualización mediante electroforesis en gel de agarosa.
MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO
CANTIDAD
1
1
1
10
1
1
1
1
1
1
MATERIAL
Micropipeta de 20 µl
Micropipeta de 200 µl
Micropipeta de 1 ml
estéril
Tubos eppendorf de 1.5 ml
estéril
Caja de puntas amarillas
caja
con
puntas
para estéril
micropipeta 1 ml
Contenedor para hielo
Mechero
Gradilla para tubos eppendorfCampana de flujo laminar
ESPECIFICACIONES
EQUIPO REQUERIDO
NOMBRE
Refrigerador
Microcentrifuga
Campana de flujo
laminar
Espectrofotómetro
Balanza analítica
Cámaras de
electroforesis
Fuente de poder
Espectrofotómetro
Celdas de cuarzo
Fotodocumentador
ESPECIFICACIONES
OTROS MATERIALES REQUERIDOS
(No suministrados por el Laboratorio)
CANTIDAD
MATERIAL
Frascos estériles
Cepas
transformadas.ESPECIFICACIONES
bacterianas
REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE
CANTIDAD
Etanol al 70%
S
I
X
X
R
O
Hielo
X
Agua destilada
X
Antibióticos para la selección del plásmido
X
Solución I: 50 mM Tris.Cl, pH 8, 10 mM EDTA,
20 mM glucosa
X
Solución II: 200 mM NaOH, 1% SDS
X
Solución III: 3 M Acetato de potasio
X
X
X
Medio de cultivo LB líquido
X
Medio de cultivo LB sólido
X
Buffer de cargade ADN
X
Solución de Bromuro de etidio
X
Agarosa
X
Amortiguador TBE 1X
X
S: Riesgo a la Salud
I: Riesgo de Incendio
R: Riesgo de reactividad
O:otras especificaciones
Manejo y disposición de los reactivos requeridos:
Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qué tipo de recipiente ponerlo
En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposición que se le
dará acada uno de los desechos (químicos y biológicos) que se generen durante la
práctica.
Nombre del reactivo
Datos importantes de la ficha técnica
PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
Preparación de las Células
Los plásmidos son preparados de crecimientos de cultivos de bacterias en de agentes selectivos
como antibióticos. (QIAGEN plasmid mini Handbook, 1997) Previo al inicio de la práctica se ha
inoculado...
Regístrate para leer el documento completo.