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Lección 2. Observación de microorganismos

1.

Fundamentos del microscopio óptico

1.1 El microscopio de campo claro
1.2 Tinción de microorganismos para su observación al
microscopio de campo claro1.3 Microscopio de contraste de fases
1.4 Microscopio de campo oscuro
1.5 Microscopio de fluorescencia

2. Microscopio confocal de barrido con láser
3. Fundamentos del microscopio electrónico
3.1Microscopio electrónico de transmisión
3.2 Microscopio electrónico de barrido

Recorrido
de la luz
Aumento

Imagen
visualizada
ojo

Lente ocular
Imagen intermedia
(invertida respecto
a la muestra)

Lenteobjetivo
Muestra
Ninguno

Condensador
Fuente de luz

Microscopio óptico

Tinción de células para
la observación microscópica

Extensión de una fina capa
de células sobre el porta

Adición delcolorante
lavado y secado
Secado al aire

Fijación por flameado del porta

Se coloca una gota de aceite
de inmersión sobre el porta y
se observa con el objetivo de
100X

Tinción de Gram
Tinción del frotisPaso 1

Paso 2

Previamente fijado al calor,
con cristal violeta
Durante 1 minuto.
Todas las células se tiñen
de color azul-violeta.

Añadir Lugol,
dejar actuar 2 minutos
Todas las células siguen
decolor azul-violeta.

Gram +

Decolorar con alcohol
Paso 3

Las células Gram +
siguen de color azul-violeta.
Las Gram negativas
se decoloran.

Tinción de contraste
Con safranina 2 minutos.
Las célulasG+
se ven azul-violeta.

Paso 4

Las G- rosas o rojas.

Gram -

Microscopio de
Campo Claro
Alga verde
(eucariota)

Microscopio de
Fluorescencia
Bacteria filamentosa
Teñida con naranja
de acridinaMicroscopio de Contraste
de Fases
Saccharomyces cerevisiae

Microscopía
Confocal por Láser
Cianobacteria
filamentosa

Microscopio láser
de barrido confocal

Sonda filogenética

Colorante fluorescenteMicroscopio de fluorescencia
Tinción células con sondas filogenéticas unidas a un
colorante fluorescente

FISH aplicado a bacterias nitrificantes de aguas residuales

Rojo: bacterias oxidadoras de...