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Citometría de Flujo

Alumno: Daniel Guzmán G.
Profesor: Paulina Bull
Curso: BIO266E

Historia
• En 1953 Wallace H. Coulter crea aparato que
podía contar las células ydiferenciarlas por
cambios de resistencia al pasar por un circuito
• Mack Fulwyler es el inventor del citómetro de
flujo como se conoce hoy en día (1965) y se le
adicionó a este latécnica de FACS en 1974
(separador de células)

Fundamento
- Forward Scatter: Tamaño
de la célula
- Side Scatter: Complejidad
de la célula
- Receptores de
fluorescenciaFACS

Utilidad relacionada con la genética
• Medición de apoptosis por método TUNEL,
adiciona nucleótidos marcados en extremos 3’
a hebras de DNA. Cuantificación por
citometríade flujo.
• Tinción de DNA, para identificar cantidad de
éste en cada célula (yoduro de propidio)

Flow FISH
•

•

Se combina la
técnica de FISH
donde se usa
una sonda dehibridación con
la citometría de
flujo para
identificar las
células que
contienen cierta
secuencia
Permite
cuantificar el
número de
copias de
elementos
específicos en el
DNAgenómico
de células

• Separación de
cromosomas
mediante FACS
• Al tener distintos
tamaños, captan
distintas
cantidades de
tinción

Ventajas y desventajas
• Ventajas: se puedenanalizar y separar grandes
cantidades de muestra, capaz de analizar
varios parámetros a la vez y rapidez
• Desventajas: instrumentación costosa, no se
pueden visualizar lascélulas que se están
analizando

Aplicaciones

Bibliografía
• Tópicos de genética, Emilio Pimentel, primera
edición, 2006.
• http://www.med.unc.edu/flowcytometry/resources/basic-flow-cytometry/sorting
• Clinical importance of DNA content in rectal
cancer measured by flow cytometry. J. R. Jass,
et al, Journey of Clinical Pathology. (1989)