2d monitoreo de un proceso de purificacic3b3n de protec3adnas
Páginas: 4 (787 palabras)
Publicado: 3 de septiembre de 2015
Monitoreo de un
proceso de
purificación de
proteínas
B. Corrimiento electroforético de las
muestras
¿Qué es la electroforesis?
Es la técnica que permite la separación
de moléculas como proteínaso ácidos
nucleicos con diferente peso molecular
y/o carga eléctrica.
Se establece un campo eléctrico
¿Cómo se separan las mezclas de
proteínas en una electroforesis?
En base a su cargaeléctrica y/o
En base a su peso molecular.
Fundamento. Las proteínas tienen una carga
eléctrica neta y un peso molecular
determinado por lo que al imponer un campo
eléctrico las proteínas migraran.
¡Lacarga de la proteína es
importante!
Moléculas con carga positiva (+) migran al cátodo (-)
Moléculas con carga negativa (-) migran al ánodo (+)
Moléculas sin carga NO presentan migraciónLa mayor parte de los sistemas electroforéticos
presentan un pH 8.3.
La mayor parte de las proteínas presentan un pI menor
a 8.3.
Por lo tanto, la mayor parte de las proteínas presentan a
pH 8.3 unacarga negativa y tienen a migrar al ánodo.
Existen diversidad de sistemas
electroforéticos:
a)
b)
c)
Tubos, placas
de vidrio, tiras
de papel
Geles nativos,
desnaturalizante
s o reductores
Enprimera o
segunda
dimensión
Componentes de un gel de
acrilamida
MONÓMERO, Acrilamida es la molécula que
es polimerizada para dar largas cadenas las
cual al ser entrecruzadas constituyen el gelsoporte.
ENTRECRUZADOR O PUENTE, N, N,
Metilenbis acrilamida, esta molécula
entrecruza químicamente las cadenas
lineales de acrilamida, originando la malla
consistente y porosa.
Continúa..
GENERADOR DE RADICALES LIBRES, Persulfato de
amonio (-03S-0-0-S03-; iniciador). En soluciones acuosas
forma radicales libres, los cuales reaccionan con los
monómeros de acrilamida, preservándose en forma deradicales que pueden polimerizarse.
CATALIZADOR, TEMED ((N,N,N,N'-tetrametilnediamina).
Existe en forma de radicales libres por lo cual contribuye
a la reacción de polimerización acelerándola.
El...
proceso de
purificación de
proteínas
B. Corrimiento electroforético de las
muestras
¿Qué es la electroforesis?
Es la técnica que permite la separación
de moléculas como proteínaso ácidos
nucleicos con diferente peso molecular
y/o carga eléctrica.
Se establece un campo eléctrico
¿Cómo se separan las mezclas de
proteínas en una electroforesis?
En base a su cargaeléctrica y/o
En base a su peso molecular.
Fundamento. Las proteínas tienen una carga
eléctrica neta y un peso molecular
determinado por lo que al imponer un campo
eléctrico las proteínas migraran.
¡Lacarga de la proteína es
importante!
Moléculas con carga positiva (+) migran al cátodo (-)
Moléculas con carga negativa (-) migran al ánodo (+)
Moléculas sin carga NO presentan migraciónLa mayor parte de los sistemas electroforéticos
presentan un pH 8.3.
La mayor parte de las proteínas presentan un pI menor
a 8.3.
Por lo tanto, la mayor parte de las proteínas presentan a
pH 8.3 unacarga negativa y tienen a migrar al ánodo.
Existen diversidad de sistemas
electroforéticos:
a)
b)
c)
Tubos, placas
de vidrio, tiras
de papel
Geles nativos,
desnaturalizante
s o reductores
Enprimera o
segunda
dimensión
Componentes de un gel de
acrilamida
MONÓMERO, Acrilamida es la molécula que
es polimerizada para dar largas cadenas las
cual al ser entrecruzadas constituyen el gelsoporte.
ENTRECRUZADOR O PUENTE, N, N,
Metilenbis acrilamida, esta molécula
entrecruza químicamente las cadenas
lineales de acrilamida, originando la malla
consistente y porosa.
Continúa..
GENERADOR DE RADICALES LIBRES, Persulfato de
amonio (-03S-0-0-S03-; iniciador). En soluciones acuosas
forma radicales libres, los cuales reaccionan con los
monómeros de acrilamida, preservándose en forma deradicales que pueden polimerizarse.
CATALIZADOR, TEMED ((N,N,N,N'-tetrametilnediamina).
Existe en forma de radicales libres por lo cual contribuye
a la reacción de polimerización acelerándola.
El...
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